精氨酸或NCG对獭母兔繁殖性能和对仔幼兔生长、抗氧化应激及免疫的影响及其机制

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精氨酸是一氧化氮(NO)、多胺以及肌酸的前体物质,可以间接地促进血管内皮的生长,改善动物的繁殖性能、生长性能、机体的代谢能力以及免疫力等。但是添加外源性的精氨酸易与赖氨酸、色氨酸和组氨酸产生拮抗作用,导致精氨酸的利用率低,而且精氨酸的价格昂贵,在生产应用中受到限制。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)是N-乙酰谷氨酸(NAG)的结构类似物,可以通过激活氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ合成内源性的精氨酸,发挥相似的生物学效应。同时,NCG价格比较低且少量添加即可发挥有效作用,目前在猪和禽类养殖业已经使用NCG做为精氨酸的替代物。然而,在獭兔上的应用研究报道较少,因此进行了本试验的研究。本论文主要就精氨酸或NCG对獭母兔的繁殖性能以及断奶幼兔生长性能、抗氧化能力、抗应激能力及免疫力的影响及其机制进行了探讨,为NCG在养兔业的推广应用提供科学依据。试验1精氨酸或NCG对獭母兔繁殖性能和对仔幼兔生长性能及血清激素水平的影响本试验分为母兔组和幼兔组。试验母兔为哺乳期獭母兔,选取体况相近45只,随机均分为5组,每组3个重复,每个重复3只,分别为基础日粮组(对照组)、基础日粮+0.3%精氨酸组(试验Ⅰ组)、基础日粮+0.6%精氨酸组(试验Ⅱ组)、基础日粮+0.03%NCG组(试验Ⅲ组)、基础日粮+0.06%NCG组(试验ⅣV组),试验期35 d。而幼兔组为挑选健康、体重相近的35日龄断奶后的幼兔100只,随机分为5组,每组5个重复,每重复4只,日粮和母兔组一致,试验期21 d。结果表明:1)对照组母兔体重下降最多,而试验Ⅱ、Ⅳ组母兔体重则出现不同程度增长,受胎率Ⅱ组最好;试验Ⅱ、Ⅳ组的吮乳仔兔21 d、35 d个体重显著高于对照组;2)36日龄仔兔(来自于母兔组断奶后1 d的仔兔)血清生长激素(GH)和胰岛素(INS)的水平,试验Ⅱ和Ⅳ组的均略高于对照组。3)幼兔试验中,各试验组末重(56日龄)均高于对照组,特别是试验Ⅱ和Ⅳ组的体重增加更明显;各试验组平均日增重显著高于对照组;试验Ⅰ、Ⅳ组采食量、料重比均显著低于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组血清GH和INS的水平均略高于对照组;而对于类胰岛素生长因子-1(IGF-1)的水平,试验Ⅱ和Ⅳ组显著高于试验Ⅰ和Ⅲ组及对照组。结论:精氨酸或NCG可以提高獭母兔的繁殖性能及断奶幼兔的平均日增重,且0.6%精氨酸和0.06%NCG效果最好;0.6%精氨酸和0.06%NCG均能不同程度地提高仔幼兔血清GH和INS的水平,且能显著提高56日龄幼兔血清IGF-1的水平。试验2精氨酸或NCG对吮乳仔兔和断奶幼兔机体NO、iNOS及肠道结构的影响试验设计同试验1。分别对来自于母兔组断奶后1 d的仔兔(36日龄)和来自于幼兔组断奶后21 d(56日龄)的幼兔采集血清和空肠,用于机体NO、iNOS及肠道结构完整性的检测。结果显示:1)36日龄吮乳仔兔各试验组空肠绒毛的高度、血清NO的水平及iNOS的活力均显著高于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组空肠隐窝的深度显著低于其它试验组及对照组;各试验组空肠NO的水平均不同程度的高于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组空肠iNOS的活力和mRNA表达水平均显著高于对照组;2)56日龄断奶幼兔试验Ⅱ和Ⅳ组空肠绒毛的长度显著高于对照组及试验Ⅰ和Ⅲ组;各试验组空肠隐窝的深度显著低于对照组;试验Ⅳ组血清NO、iNOS的水平显著高于对照组;试验Ⅱ组空肠NO的含量显著高于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组空肠iNOS的活力和mRNA的表达水平显著高于对照组。结论:精氨酸或NCG能显著提高36日龄仔兔空肠绒毛的高度、血清NO的水平和iNOS的活力及降低56日龄幼兔空肠隐窝深度;0.6%精氨酸或0.06%NCG能显著地提高仔幼兔空肠绒毛的长度及iNOS活力和mRNA水平。试验3精氨酸或NCG对吮乳仔兔和断奶幼兔抗氧化和抗应激能力的影响试验设计同试验1。本试验研究了精氨酸或NCG对仔幼兔总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、皮质酮(Cort)和HSP70的影响。结果显示:1)36日龄仔兔血清SOD的活力各试验组均略高于对照组;试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ组皮质酮的含量均显著低于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组空肠HSP70的含量及mRNA表达水平均显著高于对照组;2)56日龄幼兔的血清试验Ⅲ组和Ⅳ组SOD活力均显著高于对照组;各试验组血清皮质酮含量均有不同程度的降低,且试验Ⅱ和Ⅳ组的含量最低;各试验组空肠HSP70的含量均略高于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组空肠HSP70 mRNA的表达水平均显著高于对照组。结论:精氨酸或NCG可以不同程度地提高仔幼兔血清SOD的活力和降低血清皮质酮的水平;0.6%精氨酸或0.06%的NCG可以不同程度提高空肠HSP70含量及mRNA水平。试验4精氨酸或NCG对吮乳仔兔和断奶幼兔免疫功能的影响试验设计同试验1。本试验主要评价了精氨酸或NCG仔幼兔免疫球蛋白、细胞因子等免疫指标的影响,结果显示:1)36日龄的仔兔,试验Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ组血清IgA的含量略高于对照组;试验Ⅲ和Ⅳ组血清IgM的水平略高于对照组;试验Ⅳ组血清IL-2的含量略高于对照组;各试验组中CD8+T淋巴细胞的数量比对照组略有增加,尤其是试验Ⅱ和Ⅳ组数量最多;各试验组空肠内SIgA、IL-2和IFN-γ的含量均略高于对照组;各试验组IL-2、IFN-y和IL-1βmRNA的相对表达水平均不同程度地高于对照组;试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ组空肠IL-1β蛋白表达水平显著高于对照组;2)56日龄断奶幼兔,与对照组相比,各试验组血清IgA、IgM的含量均显著增高;试验Ⅱ和Ⅳ组血清IgG的含量显著高于对照组和其它试验组;试验Ⅱ和Ⅳ组血清IL-1β显著高于对照组;各试验组血清IFN-γ、IL-2的含量均不同程度的高于对照组;与对照组相比,各试验组中CD8+T淋巴细胞的数量有增加的趋势,尤其是试验Ⅱ和Ⅳ组数量最多;试验组空肠内SIgA、IL-2和IFN-γ的含量均略高于对照组;与对照组相比,各试验组空肠内IL-2mRNA的表达水平显著增高;试验Ⅱ和Ⅳ组内IL-1βmRNA的相对表达水平显著高于对照组;试验Ⅱ和Ⅳ组IL-1β的蛋白相对表达量显著高于其它试验组和对照组。结论:精氨酸或NCG可不同程度地提高36日龄仔兔空肠IL-2、IFN-γ和IL-1β mRNA水平及IL-1β蛋白表达;精氨酸或NCG能显著提高56日龄幼兔血清IgG、IgA和IgM量及空肠IL-2mRNA水平;0.6%精氨酸和0.06%NCG能显著提高仔幼兔空肠IL-1βmRNA及其蛋白的表达。可见,0.6%精氨酸和0.06%NCG对仔幼兔免疫指标的影响效果最好。
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