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目的:观察吉西他滨、培美曲塞单独用药及不同顺序联合应用处理外周T细胞淋巴瘤细胞株HUT78后,对其增殖及凋亡的影响,并初步探讨其可能的细胞学机制,为临床用药提供实验学依据。 方法:1体外培养HUT78细胞,连续1-7天计数并绘制其生长曲线。 2 CCK-8法测定抑制率①吉西他滨、培美曲塞不同浓度单独用药,作用HUT78细胞24h、48h、72h后测定其抑制率。 ②吉西他滨(IC50值)、培美曲塞(IC50值)单药分别作用HUT78细胞,连续5天测定其抑制率。 ③吉西他滨、培美曲塞不同顺序联合用药,作用HUT78细胞,72h后测定各组抑制率。 3吉西他滨、培美曲塞不同顺序联合用药,作用HUT78细胞,72h后用AV-PI双染法检测各组凋亡率。 4吉西他滨、培美曲塞不同顺序联合用药,作用HUT78细胞,72h后用流式细胞仪测定各组细胞周期分布的变化。 结果:1 HUT78细胞于第2天进入对数生长期,第6天进入平台期。 2 CCK-8法检测结果:①对于HUT78细胞,单药吉西他滨、培美曲塞作用均具有时间依赖性及浓度依赖性,随着时间的增加,其抑制率逐渐增加,随着浓度的增加,其抑制率逐渐增加,48h吉西他滨的IC50值为(7.50±0.71)×10-3μg/ml,培美曲塞的IC50值为(1.72±0.52)μg/ml。②吉西他滨(IC50值)、培美曲塞(IC50值)单药作用HUT78细胞1-5天,随着培美曲塞作用时间的增加,其抑制率逐渐增加,第5天抑制率最高,为(87.18±2.01)%,而吉西他滨于第3天抑制率达到最高,为(56.76±2.56)%,随后降低。③吉西他滨、培美曲塞不同顺序联合用药,于72h测定各组抑制率,G组为(55.85±2.72)%,P组为(76.37±2.83)%,G+P组为(81.66±2.26)%,GP组为(61.56±2.75)%,PG组为(86.53±2.43)%。 3吉西他滨、培美曲塞不同顺序联合用药,于72h测定各组凋亡率对照组为(6.66±0.60)%,G组为(12.02±0.91)%,P组为(25.63±0.77)%,G+P组为(29.41±0.89)%,GP组为(13.90±0.49)%,PG组为(31.69±1.16)%。 4吉西他滨、培美曲塞不同顺序联合用药,于72h测定各组细胞周期的变化:对照组S期占(26.31±0.56)%。同对照组相比,用药后均使细胞阻滞在S期,各组S期的细胞百分比分别为:G组(32.41±0.51)%,P组为(43.43±1.17)%,G+P组为(49.44±0.65)%,GP为(36.45±0.62)%,PG组为(54.32±1.09)%。 结论:1吉西他滨、培美曲塞均能抑制外周T细胞淋巴瘤细胞株HUT78的生长,且具有时间依赖性及浓度依赖性,单药吉西他滨对HUT78细胞作用的持续时间短于单药培美曲塞; 2吉西他滨、培美曲塞联合用药对HUT78细胞生长的影响同用药先后顺序相关,先用培美曲塞后用吉西他滨或培美曲塞、吉西他滨同时给药后的抑制率、凋亡率均较单药组高; 3吉西他滨、培美曲塞单药或不同顺序联合用药均将HUT78细胞周期阻滞在S期,联合用药凋亡率的差异可能与对细胞周期的影响有关。