丹参中酚酸成分与人血清白蛋白的相互作用研究

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植物药丹参中存在多种具有活性的酚酸类成分,这些成分在生物体内会与人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA)发生相互作用,从而影响其生物疗效,而对多种酚酸成分在体内的相互作用研究较少。本论文以植物药丹参中具有结构规律性的丹参素、咖啡酸、迷迭香酸三种酚酸物质为研究对象,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatograph, HPLC)及荧光光谱法,研究温度和pH值对酚酸分子与人血清白蛋白相互作用的影响,为植物提取物或混合植物药的疗效机制研究提供参考依据。研究内容包括四个方面:(1)应用平衡透析法结合HPLC,研究了温度和pH值对丹参素、咖啡酸与HSA相互作用的影响。结果表明,当温度恒定时,丹参素与HSA的结合率、结合常数随pH值的升高而增大;当pH值恒定时,其结合率、结合常数随温度的升高却降低;而咖啡酸与HSA之间的结合率、结合常数随pH值和温度的增加均增大。(2)利用平衡透析法结合HPLC,研究了不同温度及pH值条件下,丹参素、咖啡酸联合与HSA之间相互作用的变化。结果表明:当丹参素的浓度恒定时,咖啡酸与HSA的结合率、结合常数均降低;而当咖啡酸的浓度恒定时,丹参素与HSA的结合率、结合常数也同样降低。(3)采用荧光光谱法,研究了温度和pH值对咖啡酸、迷迭香酸与HSA相互作用的影响。结果表明,当温度恒定时,迷迭香酸与HSA的结合常数随pH值的增大而增大;当pH值恒定时,其结合常数随温度的升高而降低;而咖啡酸与HSA之间的结合常数随温度的增加而增大,并且在pH值7.4时,结合常数最大。迷迭香酸与HSA的作用力类型主要为范德华力和氢键,咖啡酸与HSA的作用力类型主要为疏水作用力。(4)采用荧光光谱法,研究了不同温度及pH值条件下,咖啡酸、迷迭香酸联合与HSA之间相互作用的变化。结果表明:迷迭香酸的浓度恒定时,咖啡酸与HSA作用1的结合常数降低;咖啡酸的浓度恒定时,迷迭香酸与HSA作用的结合常数也同样降低。
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