【摘 要】
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目的:体外培养rMSCs并观测其特性,观察rMSCs体内促进大鼠随机皮瓣存活的作用并探讨其可能的机制。方法:体外分离培养rMSCs,流式细胞仪(FCM)检测其表面标志。RT-PCR检测rMSCs
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目的:体外培养rMSCs并观测其特性,观察rMSCs体内促进大鼠随机皮瓣存活的作用并探讨其可能的机制。方法:体外分离培养rMSCs,流式细胞仪(FCM)检测其表面标志。RT-PCR检测rMSCs的血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达情况。Western-blotting检测rMSCs培养液的VEGF。SD大鼠随机分成2组: rMSCs组、对照组,于背部形成1.5cm×8cm的超长随意皮瓣。以4’,6二脒基-2-苯吲哚(DAPI)标记rMSCs,消化、离心、计数,注射于皮下,术后7天观察皮瓣的存活情况,计算皮瓣坏死率。取皮瓣远端标本,行HE染色观察组织学情况。免疫组化测移植组与对照组的VEGF表达情况。结果:rMSCs体外分离培养扩增5代,细胞数可达1×1011,具有多态性和贴壁生长特性,FCM检测CD34、CD45阴性, CD29、CD90阳性表达。体外培养rMSCs能表达VEGF。术后七天,在移植组皮下能检测到DAPI标记的细胞,移植组大鼠皮瓣坏死率明显小于对照组(P<0.05),移植组的皮下血管数及VEGF的表达密度和面积明显高于对照组(P<0.05)。结论:rMSCs体外扩增迅速,具有干细胞特性,体外培养能表达VEGF,局部移植rMSCs能增加皮瓣局部VEGF的表达,促进血管形成,减轻大鼠带蒂随机皮瓣的坏死。
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