目的:观察Wistar大鼠大脑中动脉永久性闭塞后不同时段,缺血半影区小胶质细胞和神经元形态学变化及永久局灶性脑缺血时bFGF在皮层和海马的表达规律,了解bFGF对脑组织的保护和修复作用,为临床脑血管病的治疗提供实验基础。 方法:将雄性Wistar大鼠48只,随机分为二组:假手术对照组8只;永久性局灶性脑缺血组40只,再根据缺血时间不同分为缺血后3天、7天、14天、28天、42天5个亚组,每亚组8只。假手术组:仅暴露大脑中动脉,但不凝闭其主干,2小时后断头取脑。永久性局灶性脑缺血组:建立大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型。按动物入组标准选择入组动物后,分别于缺血后3天、7天、14天、28天、42天断头取脑。分别行HE和免疫组化染色。观察梗死灶周围半影区的小胶质细胞和神经元的形态学变化和bFGF在皮层及海马部位的表达规律。 结果:HE染色可见假手术组光镜下神经元及组织结构无明显异常改变。脑缺血3天时镜下示:梗塞灶周围半影区神经细胞变性,半影区有少最小胶质细胞出现。脑缺血7天时镜下示:病灶中有格子细胞形成。梗塞灶周围半影区皮质神经元数目减少,排列紊乱,核固缩,半影区小胶质细胞增多,小血管增生扩张。脑缺血14天镜下示:坏死灶未继续扩大,病灶中格子细胞继续增多,在梗塞灶周围半影区小胶质细胞明显增多,小血管明显增生扩张。缺血28天,梗死灶病变稳定,而在梗塞灶周围的半影区小胶质细胞数最减少。缺血42天,半影区小胶质细胞数目趋于稳定。 bFGF在神经细胞和神经胶质细胞内均可表达,以细胞浆及胞膜表达阳性染色为主。本实验显示:假手术组脑组织bFGF呈弱阳性表达,脑缺血3天梗塞灶周围皮质神经元和胶质细胞开始表达bFGF,缺血7天bFGF表达增强,缺血14天,bFGF表达达高峰,缺血28天bFGF表达开始减弱,缺血42天bFGF仍有一定表达。bFGF在海马的表达也有相同规律。山尔大学硕上学位论文结论:1.在局灶性脑缺血恢复期梗死灶周围半影区,小胶质细胞于缺血后3天在梗塞灶半影区少量出现,7天时数最增多,14天明显增多,28天开始减少,42天趋于稳定。小胶质细胞的肥大和增生性变化,不仅对早期脑缺血发生反应,在局灶性脑缺血晚期仍显示持续性变化,表明小胶质细胞活动贯穿于脑缺血的整个病理过程,它转化为吞噬细胞清除坏死神经元,同时保护梗死灶周围存活神经元的完整性。即小胶质细胞既可以发挥细胞毒作用,也可分泌神经营养因子,对神经元起修复作用。2.正常脑组织屏GI矛呈弱}朴性表达,脑缺血3天梗塞灶周围皮质神经元和胶质细胞开始表达bFGF,缺血7大,bF’GF表达增强,缺血14天,bFGF表达达高峰,缺血28天b FGF表达开始减弱,缺血.42大bFGF仍有一定表达。bFGF在海马的表达也有相同规律。bFGF能阻l卜神经元退化,延长神经元存活,能显著促进神经元轴突生长,且它是胶质细胞有丝分裂原,促进神经胶质细胞的增殖。此表达规律表明bFGF在脑缺血修复期起到一定作用,若全面了解bFGF的表达规律,可以为临床治疗脑血管疾病开辟一条新的途径。关键词:局灶脑缺血恢复期小胶质细胞碱性成纤维细胞生长因子