SSCs相关抗原在不同家畜睾丸组织中的定位

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:p244150486
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目的:为探明不同时期不同家畜睾丸组织中干细胞的表达特点,分析不同时期牛、羊和猪睾丸的组织学特征及精原干细胞(SSCs)相关抗原Oct4、Nanog、C-kit和β1-integrin在睾丸组织中的分布规律。方法:以2.5月胎龄、4月胎龄及1年、2年的黑白花奶牛;45日胎龄、75日胎龄以及4月龄的白山羊;60日胎龄和6月龄的三元杂交杜长大猪为试验材料进行组织学HE染色和免疫组化法检测。结果:组织学观察到从性分化到出生发育过程中,早期胎儿阶段的睾丸组织原始生殖细胞(PGCs)聚集程度高,呈明显的团状细胞集落,各细胞集落之间被支持细胞分隔,随着年龄增长,呈梭形的肌样细胞分布于生精小管外周,并将细胞团分隔开,形成生精小管,闭锁状态的管腔逐步增大,继而形成腔隙。随着腔隙的增大,紧贴于生精上皮基膜的部分精原细胞逐渐形成精子。免疫组化表明Oct4、Nanog、C-kit和β1-integrin在不同的睾丸组织中,SSCs在越小胎龄的家畜睾丸组织中含量越丰富,阳性细胞数量相对较多,随着胎龄增长,家畜睾丸组织中阳性细胞数量相对减少。而家畜睾丸组织中SSCs仍然存在,但含量相对减少很多。其中,(1)Oct4的表达在各家畜睾丸组织中最为广泛,Nanog与Oct4趋势相同,但数量相对减少。其中,2.5、4月胎龄牛,45日胎龄羊睾丸组织中,阳性细胞表达于生精小管细胞团和睾丸间质细胞中;75日胎龄羊和60日胎龄猪阳性表达呈环状分布于生精小管周围,睾丸间质组成细胞中相对较少;1年牛、4月龄羊阳性细胞分布于牛睾丸组织生精小管基底膜,在睾丸间质中细胞数量较少或没有;2年牛和6月龄猪仅在睾丸组织生精小管基底膜没有或者少见阳性表达;(2)C-kit和β1-integrin可见膜表达。其中,在45日胎龄羊睾丸组织中,阳性细胞岛屿状几乎布满生精小管细胞团和睾丸间质细胞的胞膜;75日胎龄羊睾丸组织阳性细胞相对减少,膜表达于曲细精管的实质部分;60日胎龄猪睾丸组织中,阳性表达于生精小管基膜处细胞,管周间质细胞未见;2.5、4月胎龄牛睾丸组织中,阳性细胞有明显的团簇状相连;4月龄羊、1年牛睾丸组织中阳性细胞相对减少,一般膜表达于曲细精管基底膜处,偶见管周间质细胞有零星阳性细胞分布。6月龄猪睾丸组织中,C-kit阳性细胞相对减少,多见于管周间质细胞胞膜,而β1-integrin则在曲细精管基膜处和管周间质细胞均有表达。2年牛睾丸组织中,阳性表达较少,曲细精管内偶见零星的胞膜表达,而在管周间质细胞却有少量膜表达。结论:家畜SSCs从性腺分化一直存在于睾丸中,雄性化后,SSCs随着个体发育,不断分裂和迁移,最后定居于曲细精管的基膜处。SSCs在胎龄越小的家畜睾丸组织中含量越丰富,更有利于SSCs的体外分离效率,随着胎龄增长,睾丸组织中阳性细胞数量相对减少,幼年及成年后家畜睾丸组织中SSCs仍然存在,但含量逐渐减少明显,SSCs的体外分离效率降低。
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