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研究目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,内分泌治疗是主要的辅助治疗方式之一。然而内分泌药物的获得性耐药限制了乳腺癌临床治疗的效果,其中的机制仍有待研究。前期已有文献报道,NF-κ B非经典通路中RelB基因的表达高低与乳腺癌中雌激素受体表达成负相关。本研究目的是继续探索NF-κ B非经典通路与乳腺癌内分泌药物耐药之间的联系。研究方法:首先通过小剂量持续诱导法构建乳腺癌MCF-7细胞株的他莫昔芬耐药株MCF-7/TamR,随后在倒置相差显微镜下观察二者细胞形态差异,用MTT法、细胞克隆形成等实验检测生长曲线、并计算细胞倍增时间、药物毒性实验及耐药指数;同时通过RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法观察NF-κ B信号通路在细胞株间的表达差异,及他莫昔芬不同给药浓度和给药时间曲线处理后MCF-7细胞中RelB的表达变化过程。随后,利用CRISPR/Cas9技术构建稳定的内分泌耐药细胞的RelB敲除细胞株MCF-7/TamRcrRelB及231/crRelB,转染cDNA构建稳定的RelB高表达细胞株MCF-7/RelB及T47D/RelB,并观察调节RelB表达后乳腺癌细胞对内分泌药物的耐药性变化。通过检测ROS及线粒体呼吸来验证Tam对细胞代谢方面的影响。接着通过RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法观察并研究MnSOD的表达情况,并通过转染MnSOD抑制剂来抑制其表达从而验证其与RelB之间的关系。最后我们通过构建异种移植肿瘤模型,在裸鼠体内进一步评RelB对MCF-7细胞他莫昔芬耐药的影响。研究结果:MCF-7/S和MCF-7/TamR细胞形态学上有显著差异;与MCF-7/S细胞相比,MCF-7/TammR细胞对他莫昔芬的敏感性存在着显著的差异(P<0.05);耐药细胞株中NF-κ B通路的RelB基因表达明显升高(P<0.05)。在构建的MCF-7/TamRcrRelB、231/crRelB、MCF-7/RelB及T47D/RelB细胞株及原始细胞株中验证了 RelB的表达能够降低细胞对他莫昔芬的敏感性。给药后,耐药细胞中线粒体功能增强,ROS水平的上升被抑制;而给予ROS清除剂后,耐药细胞对他莫昔芬的敏感性增加。在体内实验及体外实验中均证实耐药细胞株中RelB的升高上调了 MnSOD的表达及其活性,抑制了乳腺癌细胞的氧化应激,降低了其对他莫昔芬的敏感性。结论:NF-κB非经典通路中的RelB与乳腺癌内分泌耐药有明显相关性,抑制其表达可以减弱乳腺癌细胞对内分泌药物的耐药性。本研究为乳腺癌内分泌治疗提供了有潜力的治疗靶点,并对乳腺癌内分泌治疗抵抗形成的机制研究提供新的思路。