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目的1.探讨姜黄素与5-FU联合应用对体外培养人胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用;了解一定剂量姜黄素与较低剂量5FU联用对SGC-7901细胞的生长抑制作用能否达到较高剂量5-FU单用的效果。2.探讨姜黄素与5-FU联合应用对体外培养人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用;了解一定剂量姜黄素与较低剂量5FU联用诱导SGC-7901细胞凋亡的作用能否达到较高剂量5-FU单用的效果。3.探讨姜黄素与5-FU联合应用对体外培养人胃癌SGC-7901细胞的周期影响作用;了解姜黄素与较低剂量5-FU联用诱导SGC-7901细胞周期的影响能否达到较高剂量5-FU单用的效果。4.初步揭示姜黄素与5-FU联用诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的的作用机制,为临床上联合应用姜黄素和5-FU治疗胃癌、提供实验依据。方法1.利用基于酶标仪的MTT方法检测姜黄素(20μmol/L)和5-FU(10、20、40μmol/L)单独或联合应用对体外培养人胃癌SGC-7901细胞生长与增殖的影响。2.利用PI单染的流式细胞检测法和基于AV-FITC/PI双染的流式细胞检测法分析姜黄素及其联合5-FU对胃癌SGC-7901细胞凋亡和增殖周期的影响。3.利用基于酶标仪的比色法检测姜黄素及其联合5-FU对胃癌SGC-7901细胞凋亡蛋白酶Caspase-3和Caspase-8活性的影响。4.利用Western blot方法检测姜黄素及其与5-FU联用对人胃癌SGC-7901细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果1、姜黄素联合5-FU对SGC-7901细胞增殖的抑制作用:与对照组相比,各实验组能显著抑制SGC-7901细胞增殖(*P<0.05);姜黄素联合低剂量5-FU的抑制率高于中剂量的5-FU单用(*P<0.05);姜黄素联合中剂量5-FU的抑制率高于高剂量的5-FU单用(*P<0.05)。2、姜黄素联合5-FU对SGC-7901细胞凋亡的影响:各实验组SGC-7901细胞的凋亡率都显著高于对照组(*P<0.05);姜黄素联合低剂量5-FU组细胞的凋亡率为39.3%,显著高于中剂量5-FU单用组的26.4%(*P<0.05);姜黄素联合中剂量5-FU组细胞的凋亡率为43.9%,显著高于高剂量5-FU单用组的31.9%(*P<0.05)。3、姜黄素联合5-FU对SGC-7901细胞增殖周期的影响:与对照组相比,姜黄素和5-FU均可引起SGC-7901细胞在S期的阻滞(*P<0.05);姜黄素联合低剂量5-FU组与中剂量5-FU单用组相比,处于S期的细胞比例由41.2%上升至42%(*P>0.05);姜黄素联合中剂量5-FU组与高剂量5-FU单用组相比,处于S期的细胞比例由的45.6%上升至53.8%(*P<0.05)。4、姜黄素联合5-FU对SGC-7901细胞凋亡蛋白酶Caspase-3和Caspase-8活性的影响:与对照组相比,姜黄素和5-FU组均可引起SGC-7901细胞Caspase-3、Caspase-8相对活性的显著增加;姜黄素联合低剂量5-FU组与中剂量5-FU单用组相比,Caspase-3的相对活性百分比由0.14倍(1.14±0.08)增加至0.18倍(1.18±0.09),Caspase-8的相对活性百分比由0.10倍(1.10±0.09)增加至0.13倍(1.13±0.07)(*P<0.05);姜黄素联合中剂量5-FU组与高剂量5-FU单用组相比,Caspase-3、Caspase-8相对活性分别由原来的0.35倍(1.35±0.03)、0.19倍(1.19±0.01)增加至0.4倍(1.40±0.03)、0.28倍(1.28±0.09)(*P<0.05)。5、姜黄素联合5-FU对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响:与对照组相比,实验组的Bax蛋白表达显著增加,而(*P<0.05);姜黄素联合低剂量5-FU组与中剂量5-FU单用组相比,Bax蛋白表达显著增加(相对值分别为2.56±0.09;1.33±0.01),而Bcl-2蛋白表达显著降低(相对值分别为0.76±0.04;0.88±0.05);姜黄素联合中剂量5-FU组与高剂量5-FU单用组相比,Bax蛋白表达显著增加(相对值分别为3.27±0.06;2.19±0.05),而Bcl-2蛋白表达显著降低(相对值分别为0.33±0.01;0.53±0.02)(*P<0.05)。结论1、姜黄素与低剂量5-FU联用对体外培养的胃癌SGC-7901细胞的的生长抑制和促凋亡作用能够达到高剂量5-FU单用的效果;2、姜黄素与低剂量5-FU联用对胃癌SGC-7901细胞的凋亡蛋白酶Caspase-3和Caspase-8相对活性的增强效应显著高于高剂量5-FU单用的效果;3、姜黄素与低剂量5-FU联用与高剂量5-FU单用对体外培养的胃癌SGC-7901细胞的Bax蛋白表达显著增加、Bcl-2蛋白表达显著降低。