研究背景:脊髓损伤后机体反应机制复杂,如何提高脊髓损伤的治疗效果具有较高的临床价值。芬戈莫德(fingolimod,FTY720)是一种应用于多发性硬化治疗的药物,具有一定的神经系统保护作用。聚乳酸羟基乙酸(polylactic-co-glycolic acid,PLGA)是一种拥有良好的组织相容性和机械性能的高分子化合物,在组织工程中有广泛的应用。本研究前期初步摸索了静电纺丝技术的工艺条件,并通过静电纺丝技术制备了载有FTY720的PLGA纳米纤维支架,结果发现不同质量比的FTY720影响载药纤维支架纤维直径和亲水性。另外,有研究表明神经干细胞(neural stem cell,NSC)在脊髓损伤修复中具有明显作用,因此本研究试图通过构建FTY720静电纺丝支架负载NSC,探究并证明载有NSC的FTY720静电纺丝支架在脊髓修复中具有促进作用,具有原创科学意义。研究目的:制备载有NSC的FTY720/PLGA静电纺丝支架并对其纤维直径,接触角等相关表征进行测定,探究FTY720的质量比对NSC增殖分化的影响,并利用载有FTY720的静电纺丝支架共载NSC原位移植治疗脊髓损伤,证明FTY720/PLGA静电纺丝支架负载NSC能够通过促进NSC增殖,抑制星形胶质细胞增生等机制促进脊髓损伤修复。研究方法:首先利用静电纺丝技术,将FTY720和PLGA按不同比例混合,制备含有不同质量比FTY720的PLGA静电纺丝膜。将NSC在不同种类的静电纺丝膜上进行培养,通过细胞增殖实验观察不同质量比的FTY720对NSC增殖的影响。随后利用免疫荧光染色和实时定量PCR技术探究不同质量比的FTY720对NSC分化的影响。最后将载有NSC和FTY720的PLGA静电纺丝支架植入到大鼠脊髓损伤模型的损伤部位,利用运动功能评分来探究脊髓损伤后功能恢复情况。通过HE染色和免疫荧光染色,对损伤后局部组织再生情况和神经细胞数量进行评估,观察脊髓损伤后功能恢复情况。研究结果:研究结果发现,随着FTY720质量比的增加,支架的纤维直径逐渐较小,亲水性增强,提示混有FTY720的静电纺丝支架有利于NSC的粘附和生长;细胞实验发现质量比为1%的FTY720对NSC的增殖具有明显促进作用,FTY720能够促进NSC向少突胶质细胞分化,同时显著抑制NSC向星形胶质细胞分化,说明FTY720能够促进NSC向有利于神经功能修复的方向进行分化;动物实验结果表明,载有FTY720的PLGA静电纺丝支架联合NSC能够促进后肢大鼠运动功能恢复,说明这种新型的治疗组合能够明显提高脊髓损伤后的恢复效果。研究结论:混有FTY720的PLGA静电纺丝支架具有适宜NSC粘附生长的纤维直径和亲水性,载有FTY720的PLGA静电纺丝支架联合NSC移植治疗脊髓损伤可以有效恢复大鼠的运动功能,并促进新生神经元的形成,抑制星形胶质细胞的产生。将NSC和FTY720/PLGA静电纺丝支架联合应用治疗脊髓损伤具有很好的应用前景。