论文部分内容阅读
目的通过姜黄素(Curcumin)对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Human keloid fibroblasts,HKF)的异常增殖、细胞凋亡及各周期的影响,初步分析其可能的作用机制。方法(1)体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,选取同一代生长状态良好处于对数生长期的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,经不同浓度(0、5、10、20μmol/1)的姜黄素处理后,以MTT法检测其增殖抑制情况。(2)通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测经姜黄素处理的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,随着药物浓度的增加各细胞周期的分布情况及凋亡情况。(3)通过免疫印迹法(Western blot)检测将人瘢痕疙瘩成纤维细胞经不同浓度姜黄素处理后,人瘢痕疙瘩成纤维细胞p27的表达情况。结果(1)人瘢痕疙瘩成纤维细胞经不同浓度姜黄素处理后,MTT结果显示,姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖有抑制作用(P<0.01),且其细胞增殖抑制率与姜黄素浓度呈正相关。(2)流式细胞术检测凋亡结果显示,人瘢痕疙瘩成纤维细胞总凋亡率随着姜黄素浓度的增加而增加(P<0.01),且呈浓度依赖性。流式细胞术检测细胞周期结果显示,随着药物浓度的增加,细胞阻滞在G0/G1期比例增加(P<0.01),呈明显的浓度依赖关系。(3)免疫印迹法结果显示随着姜黄素药物浓度的增加p27蛋白表达量显著上调(P<0.01)。结论(1)姜黄素处理人瘢痕疙瘩成纤维细胞后,可抑制其生长,且呈明显的量效关系。(2)姜黄素可促进人瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡,诱导人瘢痕疙瘩成纤维细胞阻滞在G0/G1期,呈明显的量效依赖关系,从而发挥抗瘢痕的作用。(3)不同浓度姜黄素作用于人瘢痕疙瘩成纤维细胞后,可使p27蛋白的相对表达量显著上调。(4)姜黄素可能通过上调p27蛋白的表达,诱导细胞阻滞及促进其凋亡,从而抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长。