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目的:构建结核分枝杆菌MPT64原核表达载体pET32a-MPT64并诱导其表达、纯化及鉴定目的蛋白。方法:采用PCR从MTB H37Rv株DNA基因组中扩增MPT64基因,将目的片段克隆至pET32a载体中进行测序。鉴定阳性重组质粒pET32a-MPT64,经测序证实与Genebank公布的基因序列基本一致。将MPT64基因亚克隆入pET32a原核表达载体,酶切鉴定阳性重组质粒pET32a-MPT64,并用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE检测和Western-blot鉴定表明,在相对