【摘 要】
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赭曲霉毒素(Ochratoxins, OTs)是一类主要由赭曲霉和纯绿青霉等产毒菌株产生的一系列结构相似的次生代谢产物,其中以赭曲霉毒素A(OTA)污染范围最广,毒性最大,对人类的健康影
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赭曲霉毒素(Ochratoxins, OTs)是一类主要由赭曲霉和纯绿青霉等产毒菌株产生的一系列结构相似的次生代谢产物,其中以赭曲霉毒素A(OTA)污染范围最广,毒性最大,对人类的健康影响最大。我国现行的国家标准《食品中真菌毒素限量》规定:谷物、大豆及其加工产品中赭曲霉毒素A的含量不得超过5μg/kg。因此,需要一种简单、灵敏、有效且快速的检测方法对食品中的OTA进行监测。本研究根据间接性免疫竞争的原理,利用游离OTA和赭曲霉毒素A-牛血清白蛋白(OTA-BSA)竞争结合定量的OTA单克隆抗体,研发了一种快速检测OTA的电化学免疫传感策略。首先将OTA-BSA抗体蛋白固定在事先已经用羧基功能化的单壁碳纳米管/壳聚糖纳米复合材料修饰好的玻碳电极表面以获得所需要的电化学免疫传感器。然后,将稀释后的OTA单克隆抗体和一系列不同浓度的OTA标准溶液同时滴加到固定有OTA-BSA的传感界面进行竞争反应。竞争反应完成后,在电极表面滴加碱性磷酸酶修饰的抗小鼠IgG的二抗(ALP-anti-antibody),通过ALP催化反应底物中的α-萘酚磷酸盐(a-NP)而产生电化学信号。该传感器检测OTA的线性范围为0.01-100ng/ml,检测限为4pg/ml,低于意大利规定的婴幼儿及儿童食品中OTA的限定值(0.5μg/kg)。本研究成功的研发了一种灵敏度高、特异性好、具有可重复性的电化学免疫传感器用于检测OTA,该传感器将成为食品安全领域OTA定量检测的一种有力的工具。
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