1目的复方血栓通胶囊由三七、黄芪、丹参、玄参四味药材组成,方中三七为临床治疗血淤兼气阴两虚的首选药物,由于该药材货源紧俏、价格昂贵,以三七茎叶代替三七投料的现象时有发生,再加上中成药中非法添加化学药物、原料中农药残留等事件,为更好控制复方血栓通胶囊的药品质量,从安全性和有效性对其进行探索性研究。2方法黄曲霉毒素、胶囊中的铬、有机氯农药残留的测定参照《中国药典》黄曲霉毒素测定法、明胶胶囊中铬测定法和有机氯农药残留量测定法测定。非法添加物筛查采用HPLC法,流动相为磷酸盐缓冲液-甲醇,筛查成分为盐酸普萘洛尔、盐酸维拉帕米、盐酸普罗帕酮、阿替洛尔、盐酸索他洛尔。特征图谱的建立采用UPLC法,以乙腈(A)和水(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长203nm。三七茎叶皂苷的快速定性鉴别采用超高效液相色谱法-电喷雾-飞行时间高分辨率质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)。一测多评法测定丹参酮类成分和哈巴俄苷的含量,采用HPLC法,以丹参酮ⅡA为内标物计算丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和哈巴俄苷的相对校正因子,计算各成分的含量。丹酚酸类成分含量测定采用HPLC法,以乙腈(A)和0.3mol/L的甲酸(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长为230nm。毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定采用HPLC法测定,以乙腈-0.3%甲酸溶液(17:83)为流动相,检测波长为260nm。黄芪甲苷的含量测定采用HPLC法,以乙腈-水(70:30)为流动相,蒸发光散射检测器,漂移管温度110℃,蒸发温度105℃,氮气流速:1.5ml/lmin。3结果黄曲霉毒素、非法添加物(盐酸普萘洛尔、盐酸维拉帕米、盐酸普罗帕酮、阿替洛尔和盐酸索他洛尔)、有机氯农药残留量均未检出。明胶胶囊壳中铬的限度为不得过百万分之二(2mg/kg),复方血栓通胶囊中检出铬的含量范围为0.03~0.80mg/kg,均符合规定。建立的特征图谱呈现8个特征峰,能准确对处方中三七、黄芪、丹参和玄参四味药材进行定性鉴别,复方血栓通胶囊的特征图谱检测均符合规定。建立的三七茎叶皂苷液质联用快速定性鉴别法,通过三七茎叶皂苷的定性离子(407.37/425.38/899.54/917.55/295.10/325.11)能快速鉴别三七茎叶皂苷,复方血栓通胶囊中均未检出三七茎叶皂苷。建立的一测多评法测定丹参中丹参酮类成分和玄参中哈巴俄苷的含量,丹参酮类成分(隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱa总含量)含量范围为81.56~296.27μg/g,限度为121.9μg/g,有12批低于限度;哈巴俄苷的含量范围为47.49~182.00μg/g,限度为66.5μg/g,有3批低于限度。建立的hplc法同时测定复方血栓通胶囊中丹酚酸类成分,丹参素钠的含量范围为0.06~0.32mg/g,迷迭香酸的含量范围为0.08~0.26mg/g,丹酚酸b的含量范围为0.58~2.136mg/g,限度分别为0.10mg/g、0.12mg/g、1.17mg/g,分别有11批、8批和5批低于限度。建立的hplc法测定复方血栓通胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,结果显示其含量范围为12.62~104.74μg/g,限度为37.5μg/g,有11批样品低于限度。建立的elsd-hplc法测定复方血栓通胶囊中黄芪甲苷的含量,结果显示其含量范围为0.12~0.30mg/g,限度为0.13mg/g,有2批样品低于限度。4结论采用的方法能准确、快速的测定复方血栓通胶囊中黄曲霉素、胶囊铬的含量和有机氯农药残留量,以及能快速筛查出该制剂中是否非法添加盐酸普萘洛尔、盐酸维拉帕米、盐酸普罗帕酮、阿替洛尔和盐酸索他洛尔。黄曲霉毒素、非法添加物、有机氯农药残留未检出,胶囊壳中铬含量都在限度范围以内,说明复方血栓通胶囊的安全性较好。特征图谱方法可行、方便,可有效控制复方血栓通胶囊的质量。三七茎叶皂苷采用液质联用法能准确、快速定性鉴别,样品检测中未发现以三七茎叶代替三七投料的现象,说明该制剂的三七投料比较稳定。一测多评法能节约对照品、同时能快速、准确测定丹参酮类成分和哈巴俄苷的含量,hplc法测定丹酚酸类成分、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和elsd-hplc法测定黄芪甲苷的含量,方法都操作简便、结果准确度可靠、灵敏度高、重复性好,能对制剂中的活性成分进行定量控制。样品测定结果显示丹参的脂溶性成分丹参酮类和水溶性成分丹酚酸类、黄芪的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、玄参的哈巴俄苷含量差异悬殊,说明复方血栓通胶囊中丹参、黄芪、玄参的原药材质量控制有待加强,质量标准有待进一步提高,产品质量有待进一步提升,从而保证该制剂的均一性和有效性。