ATP偶联的膜转运蛋白不仅具有转运离子和代谢产物的功能，近年来已被证明同时具有传递细胞信号的功能，具有与G偶联蛋白受体相似的功能和机制，是重要的药物靶标群。本研究主要对一个重要的P型ATP偶联膜转运蛋白—Na/K-ATP酶的功能亚基α1如何调节偶联Src蛋白介导的信号转导功能进行了阐述，以便深入探讨其作为药物治疗靶标的多重性。　　 钠钾ATP酶（Na/K-ATPase），又称钠泵，其α1亚基(α1Na/K-ATPase)拥有离子转运和信号传导的双重功能。在上皮细胞中，α1Na/K-ATPase能和Src激酶形成受体复合物，此受体复合物在ouabain刺激下能激活Src激酶，并且体外实验已经证明这个Src的激活作用是跟α1Na/K-ATPase的构象转化密切相关的。强心苷类药物作用于Na/K-ATPase时同时影响了这两个功能，这也是其毒副作用的来源。而到目前为止对Na/K-ATPase的一个研究瓶颈是我们无法将细胞内Na/K-ATPase的离子转运和信号传导功能分开。　　 本论文利用基因点突变法构建了一个新的突变α1Na/K-ATPase，它仍保留了Na/K-ATPase的离子泵功能，但是丧失了对Src蛋白及其下游信号通路的调控作用。已报道在体外实验中鉴定出α1Na/K-ATPaseN端的Naktide（S415到Q434）是和Src蛋白激酶结构域结合的部位，其中Naktide能结合并抑制Src活性。而本论文在此基础上进一步研究了Naktide和Src结合的分子机制。首先通过体外脯氨酸突变Naktide（脯氨酸替代丙氨酸能剖坏螺旋结构）和Src激酶活性实验证明破坏Naktdie的螺旋结构后，Naktide不在有效抑制Src活性；再次，在细胞中表达A420P突变的α1Na/K-ATPase后，细胞内Src活性显著增加，配体ouabain不能再通过α1来激活Src蛋白，并且经测定此突变不影响α1的离子转运活性和构象转化功能。　　 本论文还创建了一对构象转化缺陷的细胞株，进一步从细胞实验证明了α1Na/K-ATPase自身构象转化对动态调节细胞内Src活性的重要作用。已经报道经过纯化的Na/K-ATPase体外实验，证实α1对Src的调控是具有构象依赖性的，即在E1构象时，α1结合并抑制Src活性；而在ouabain结合的E2构象时，Src被激活。本论文则进一步从细胞水平研究这个α1蛋白构象转化对结合Src并调控其信号转导的作用。首先采用点突变法创建了I279A（细胞内α1多数停滞在E1构象，叫做E1样细胞）和F286A（细胞内α1多数停滞在E2构象，叫做E2样细胞）这一对构象转化缺陷的细胞系。跟体外实验结果一致，在E1样时，细胞内Src活性被抑制，而在E2样时，细胞内Src活性显著高于E1样细胞。并且在这两个细胞内，ouabain都不能再激活Src，同时我们发现这个α1构象转化缺陷对Src信号的影响是特异性的，因为它不改变ouabain引起的Akt信号变化。　　 综上所述，本论文首次创建了两组细胞模型，一组是A-P突变α1，其中的典型模型A420P突变α1，在细胞水平，它仍然有完好的离子泵功能，但是不能调控Src蛋白及其下游信号通路。这证实了Naktide的螺旋结构在结合并调控Src过程中的重要性。另一组模型是α1构象转化缺陷型细胞。从细胞水平，我们认识到α1构象转化的这种动态平衡对于α1调节Src活性及其下游信号通路具有重要意义。这些新的突变α1细胞模型可以作为筛选特异性的Na/K-ATPase/Src受体复合物的激动剂和拮抗剂的工具，来研发新型抗肿瘤，抗高血压等心血管疾病药物；同时我们可以利用这些突变α1创建转基因小鼠模型，来研究CTS类化合物在动物生理、病理、药理状态下对Src的调控，进一步从体内水平了解Na/K-ATPase对Src调节的重要性。