疏肝补肾法对慢性应激模型小鼠子宫内膜容受性的调节及作用研究

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目的:本实验以慢性应激雌性小鼠模型为研究对象,以疏肝补肾中药进行干预,采用免疫组化、分子生物学等技术,对比各组小鼠血清E2、P、HCG水平、见栓率、着床数和子宫内膜容受性相关因子VEGF,探讨慢性应激对孕鼠子宫内膜容受性的影响及疏肝补肾中药的调节作用及机制,并为其有效防治提供新方法和新思路。方法:将105只SPF级6周龄KM雌性未孕小鼠随机分为7组,每组小鼠数量为15只,即空白对照组(空白组)、应激模型组(模型组)、逍遥丸组、左归丸组、逍遥丸加左归丸组(逍加左组)、疏肝补肾中药高剂量组(高剂量组)、疏肝补肾中药低剂量组(低剂量组),除空白组外其余各组均接受21天应激刺激,在刺激期间各组分别灌药,造模成功后进行行为学检测。当晚8点各组小鼠按雌雄2:1合笼,次日上午7:00检栓,以发现阴道栓定为妊娠第一天(D1)。受孕后各组小鼠仍接受慢性应激刺激,并给予孕后方药继续灌胃,于妊娠D5天上午9点摘眼球取血并处死,分别取材进行相关指标测定。结果:(1)与模型组相比,左归丸组、逍加左组、疏肝补肾高剂量组小鼠刺激后一般情况良好、体重增长较快,差异有统计学意义(P<0.05)(2)与模型组相比,空白组、逍遥丸组、逍加左组、高剂量组的中央格停留时间、悬尾静止不动时间缩短,差异有统计学意义(P<0.05);空白组、高剂量组、逍加左组水平穿格数增加,差别有统计学意义(P<0.05);空白组直立次数明显增加(P<0.05),其余组虽有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)(3)与模型组相比,空白组、逍加左组和高剂量组小鼠血清E2、P、HCG水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);(4)与模型组相比,其他各组孕鼠子宫内膜VEGF水平均明显升高,差异具有显著性(P<0.01)。与空白组相比,逍加左组与高剂量组孕鼠子宫内膜VEGF水平明显升高,且有显著差异(P<0.01)(5)与模型组相比,空白组、逍加左组与高剂量组见栓率以及胚胎着床数均明显高于模型组数据,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.疏肝补肾方可改善慢性应激雌性小鼠的行为学指标,缓解慢性应激雌性小鼠的肝郁状态。2.疏肝补肾方能调节慢性应激雌性小鼠的性激素水平,通过提高E2、P水平,促进胎盘分泌HCG,改善子宫内膜微环境。3.疏肝补肾方能调节慢性应激小鼠VEGF水平,使慢性应激刺激下小鼠子宫内膜VEGF表达水平升高,改善围着床期子宫内膜微环境。4.疏肝补肾方能调节慢性应激小鼠的性周期、提高着床数。5.本实验初步研究了慢性应激影响子宫内膜容受性的病理机制及中药的作用机理,为其有效防治提供新方法和治疗新思路。
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