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以孕烯醇酮为唯一碳源,经初筛、复筛后从土壤中得到能够转化C21甾体化合物的菌株,并利用生理生化实验、形态学和分子生物学鉴定菌株,对细菌进行16S rDNA基因序列、真菌进行18S rDNA基因序列同源性B LAST分析。据BLAST分析结果,利用MEGA(5.05)软件创建Neighbor-Joining进化树,确定菌株的系统发育学地位。菌株转化C21甾体经浓缩、萃取、浓缩得到转化产物粗品,经硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析分离纯化化合物,对纯化的化合物进行1H-NMR,13C-NMR(DEPT 135°和DEPT 90°),2D-NMR(HSQC、HMBC)等核磁共振波谱分析,利用高分辨率质谱仪确定化合物分子量。DNA测序筛选分离得到的菌株,测得菌株DH的16S rDNA有1385个碱基,菌株YM3的16S rDNA有1482个碱基,两株菌都属假单胞属(Pseudomonas),都为革兰氏阴性菌,其中菌株DH为假单胞杆菌(Pseudomonas),菌株YM3为铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa);菌株T3的18S rDNA基因序列有1314个碱基,属于曲霉属(Aspergillus),为烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus)。将这些碱基序列上传于BankIt中得到登录号,DH菌株登录号为MF542259.1,YM3菌株登录号为MG262387.1,T3菌株登录号为MF563964.1。通过核磁共振和质谱分析确定转化产物为1,2,10-三羟基菲和7-羟基苯并吡喃,并发现1,2,10-三羟基菲对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌都有抑菌活性,化合物浓度为0.5 mg/mL时,抑菌圈的大小分别为18 mm、17 mm、25 mm。经单因素试验优化后,假单胞杆菌DH转化16,17-α环氧孕烯醇酮的发酵工艺进行初步优化得到产物7-羟基苯并吡喃的最优条件为:1.5 g/L 16,17-α环氧孕烯醇酮的SDS乳化液为碳源,2.0 g/L NH4NO3为氮源,初始pH值为7.0,接种量为10%,250mL锥形瓶中装液量达到100 mL,转化时间为5 d;产物1,2,10-三羟基菲的最优培养条件为:1.5 g/L 16,17-α环氧孕烯醇酮的SDS乳化液为碳源,3.0 g/L NH4NO3为氮源,初始pH值为6.5,接种量为10%,装液量达到80 mL,转化时间为5 d。烟曲霉菌T3转化孕烯醇酮的发酵工艺进行初步优化,得到最优条件为:底物浓度孕烯醇酮乳化液为1.0 g/L,氮源NH4H2PO4为2.0 g/L,初始pH为7.0,接种量为10%,装液量为70 mL,发酵时间为6 d。此条件下产物产率为28.48%,比之前提高9.52%;菌体生物量为4.73 g/L比之前提升了2.11 g/L。菲及其衍生物存在于大多数植物,还未见有报道从微生物转化过程得到。本文利用微生物转化孕烯醇酮和16,17-α环氧孕烯醇酮得到有抑菌活性的菲类化合物,为微生物转化C21甾体提供依据。