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目的：利用蛋白芯片技术(protein chips Technology)分析高脂饮食诱导ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)模型相关蛋白及细胞因子,探讨加味丹参饮对ApoE-/-小鼠血管内皮细胞(VEC)的保护作用及抗AS的机制并进行临床验证。方法：1.ApoE-/-小鼠饲以高脂饲料12周建立AS模型,随机分为加味丹参饮低剂量组、加味丹参饮高剂量组、辛伐他汀+阿司匹林对照组和模型组；同周龄、品系C57BL/6J小鼠为空白组,饲以普通饲料；药物干预8周后观察血清血脂、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,HE染色光镜下观察小鼠主动脉斑块病理形态,透射电镜观察主动脉内皮细胞超微结构。2.采用Ray Biotech QAM-CAA一4000抗体蛋白芯片对模型组／加味丹参饮治疗组小鼠主动脉斑块组织裂解液先进行细胞因子的蛋白芯片靶点筛选,选取信号值和Fold change值最大及与AS相关的Pro-MMP、9、bFGF、 VEGF为差异因子,进一步通过免疫印迹技术(Western blot,WB)及即时PCR技术(RT-PCR)进行验证。3.将符合原发性高脂血症合并颈动脉粥样硬化斑块纳入标准的患者随机分为超微加味丹参饮治疗组(约为临床传统剂量的1/3)和辛伐他汀+阿司匹林对照组,连续治疗6月后观察血脂、血清hs-CRP、VEGF、(MMP-9及颈动脉内膜中层厚度(IMT)、颈动脉内膜斑块面积的变化并比较不良反应。结果：1.模型组TC、TG、LDL-C明显上升,HDL-C明显下降(P<0.05或P<0.01),高脂饮食可诱导ApoE-/-小鼠形成严重的高脂血症和早期AS病变。加味丹参饮能降低TC、LDL-C和升高HDL-C(P<0.05),各给药组疗效相当(P>0.05)。加味丹参饮能降低血清hs-CRP水平,降低ET同时升高NO含量,下调VEGF、MMP-9水平(P<0.05或P<0.01),除hs-CRP外,均优于低剂量组(P<0.05),呈剂量依赖性；中药高剂量组与西药对照组对hs-CRP、NO、VEGF、MMP-9的作用相当(P>0.05),在降低ET方面优于西药对照组(P<0.05)。加味丹参饮可改善主动脉斑块及内皮细胞超微结构和功能。2.200种蛋白芯片检测结果显示：ApoE-/-小鼠模型组/加味丹参饮治疗组,共发现51种有显著性差异的蛋白,其中,上调蛋白39种；下调蛋白12种；信号值最大的为bFGF,最大fold change比值为Pro-MMP-9为13.665。若选取信号值大于500,fold change大于1.5,小于0.66的为差异因子,则包含另外31个差异蛋白。3.加味丹参饮可下调主动脉斑块组织裂解液中VEGF、MMP-9、bFGF蛋白及基因表达(P<0.05或P<0.01),抗体蛋白芯片结果与WB、RT-PCR验证结果基本一致。加味丹参饮高剂量组与辛伐他汀+阿司匹林对照组VEGF、MMP-9、bFGF蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05),优于低剂量组(P<0.05)；中药组MMP-9mRNA表达水平呈剂量依赖性,各给药组的VEGF、bFGF mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。4.超微加味丹参饮能显著降低高脂血症合并颈动脉粥样硬化斑块患者的TC、TG、LDL-C、APOB及hs、CRP、VEGF、MMP-9水平,降低颈动脉IMT,减少颈动脉内膜斑块面积,升高HDL-C、APOA水平(P<0.05或P<0.01),从而延缓动脉粥样硬化形成；与辛伐他汀+阿司匹林对照组比较,超微加味丹参饮治疗组在降低TC、APOB、VEGF及MMP-9水平,降低颈动脉IMT值,缩小颈动脉内膜斑块面积,升高HDLC方面疗效更优(P<0.05),而对hs-CRP的作用两组相当,且临床未见明显毒副作用,综合疗效优于常规西药治疗。结论：1.高脂饮食可建立稳定的ApoE-/-小鼠AS模型,是研究AS的理想模型。2.ApoE-/-小鼠模型组／加味丹参饮治疗组主动脉斑块组织裂解液200种蛋白芯片检测共发现51种有显著性差异的蛋白。其中,上调蛋白39种,下调蛋白12种。若选取fold change大于1.5,小于0.66的为差异因子,则包含更多炎症因子。提示炎症反应是导致内皮细胞损伤、功能紊乱,斑块进展的重要机制,但尚有免疫调节参与其中,说明AS病理机制的复杂性。NF-κB是参与炎症调控的重要信号通路之一,因此我们推断TLR4/NF-κB、 MAPKs等信号通路可能参与其调控,需进一步验证。3.加味丹参饮可通过调节血脂,降低血清hs-CRP、ET水平,下调血清VEGF、MMP-9水平及斑块组织中VEGF、MMP-9、bFGF蛋白及基因表达,升高NO含量,减轻炎症损伤,保护内皮细胞,改善主动脉内皮细胞超微结构和功能,减轻ApoE-/-小鼠的AS病理损伤,稳定斑块,延缓AS进程,综合疗效优于常规西医治疗,其疗效与剂量有一定的相关性。抗体蛋白芯片结果与WB、RT-PCR验证结果基本一致。这可能是其抗AS的机制。4.超微加味丹参饮通过调节血脂、降低hs-CRP抑制炎症,下调血清VEGF、MMP-9稳定斑块,降低IMT值,缩小颈动脉内膜斑块面积发挥抗AS作用,对原发性高脂血症合并颈动脉粥样硬化斑块有较好的疗效,且临床未见明显毒副作用,优于常规西药治疗。