转g10evo基因抗草甘膦大豆的研究

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大豆[Glycine max (L.)]是重要的粮油、饲料和经济作物,杂草防治是大豆栽培管理中的重要工作,种植抗除草剂转基因大豆可以大幅度提高杂草防治效率,降低杂草防治成本。本研究以本实验室获得的草甘膦抗性基因glOevo构建植物转化载体pCAMBIA1300-35S-g10evo,利用农杆菌介导法侵染大豆子叶节,通过诱导、筛选获得抗草甘膦转基因大豆。本研究对获得的转基因大豆进行草甘膦抗性水平筛选,获得具有良好抗性的转化株系G10evo。利用Western blot法检测G10evo草甘膦抗性基因glOevo的表达,检测到大小约为46kDa的表达蛋白;利用酶联免疫法定量分析转基因大豆G10evo V4期抗草甘膦基因的表达量,结果显示第二片复叶的EPSPS(5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶)含量为276.73μg/g,占总可溶性蛋白的0.76%。Southern blot分析结果显示,G10evo含有的外源抗草甘膦基因为单拷贝插入。遗传稳定性分析表明,g10evo基因在G10evo各代中能够稳定遗传。在温室中进行草甘膦抗性测定,施用4倍正常田间浓度的草甘膦对G10evo没有明显的药害。G10evo能高抗草甘膦,具有产业化应用前景。
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