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目的叶酸对于嘌呤合成和DNA甲基化是很重要的,而它们对保证DNA完整性和调节基因表达来说是两个关键的步骤。叶酸缺乏导致尿嘧啶错误加入、DNA异常甲基化、染色体断裂。亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylene tetrahydrofolate reduetase, MTHFR)是甲硫氨酸-叶酸代谢中的一个关键酶,它将体内的5,10-亚甲基四氢叶酸还原为5-甲基四氢叶酸,成为体内叶酸的主要活性形式。正常的MTHFR活性能保证叶酸代谢、DNA合成和甲基化的正常进行。MTHFR的催化作用决定了细胞中叶酸是进入甲基化途径还是参与核苷酸合成,而MTHFR基因发生突变,将会影响MTHFR酶的活性及DNA合成和甲基化,从而成为疾病风险因子。同时VitB12作为辅酶参与了嘌呤和嘧啶的合成,它们的不平衡可能影响核酸代谢,造成DNA合成和修复障碍,参与了致癌的过程。由于所有这些机制都参与了致癌过程,所以它们与乳腺癌或其它肿瘤的发展就有关联。本研究分析了叶酸、维生素B12、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因型在云南籍乳腺癌人群、乳腺良性疾病人群和正常人群中的分布差异,初步探索了叶酸、维生素B12、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因型与乳腺癌易感性之间的相互关系。方法1.根据知情同意原则,取受试者空腹外周血5ml。取4m1血分离血清以放射免疫法,测量乳腺癌患者和对照样本血清中叶酸及维生素B12的含量。2.取上述1ml空腹外周血,按照北京天根公司生产的血液DNA抽提试剂盒进行核DNA抽提。3.以普通PCR-RFLP技术,对64例云南籍乳腺癌患者、59例乳腺良性疾病患者和62例正常人群MTHFR 677位点1298位点多态性进行筛查,并对64例乳腺癌患者MTHFR基因型与雌激素受体(Estrogen Receptor,ER)、孕激素受体(Progesterone Receptor, PR)情况的分布频率进行比较。4.分别比较叶酸、维生素B12在MTHFR 677位点CC、CT、TT三个亚组及1298位点AA、AC、CC三个亚组之间的浓度水平有无明显差异。结果1.研究结果显示,MTHFR677位点突变纯合体(TT)在受试的乳腺癌人群(n=64)和正常对照组(n=62)以及良性病人组(n=59)中的分布频率分别为9.38%,18.75%和16.13%,无显著性差异；MTHFR1298位点突变纯合体(CC)在相应的受试乳腺癌人群(n=64)和正常对照组(n=62)以及良性病人组(n=59)中的分布频率分别为3.13%,10.17%和3.23%，亦无显著性差异。本课题结果提示MTHFR 677和1298基因型多态性与云南籍人群的乳腺癌易感性之间无明显相关性。2.在64例乳腺癌病例组中在雌激素受体和677基因型之间x~2=74.86>x~20.005,2,p<0.005,说明两者之间有关联,雌激素受体和1298基因型之间x~2=69.11>x~20.005,2,p<0.005,说明两者之间有关联,孕激素受体和677基因型之间x~2=69.34>x~20.005,2,p<0.005,提示两者之间有关联,孕激素受体和1298基因型之间x~2=74.70>x~20.005,2,p<0.005,提示两者之间有关联.提示云南籍乳腺癌人群MTHFR基因型与雌激素受体ER孕激素受体PR情况的分布频率有相关性。3.64名乳腺癌患者与59名乳腺良性肿瘤患者及62名正常对照组之间叶酸及维生素B12水平之间的差异无统计学意义(P>0.05)。8名乳腺癌677TT组人群叶酸及维生素B12水平明显低于其他人群组。2名乳腺癌1298CC组人群维生素B12水平明显低于其他人群组。而在其他各组之间叶酸及维生素B12水平无明显的差异性。结论本研究虽未明确MTHFR基因单核苷酸多态性与乳腺癌风险增高有相关,但叶酸摄入量低和(或)叶酸代谢障碍可能在乳腺癌变中起作用,尤其是在乳腺癌677TT组和1298CC组中补充叶酸及维生素B12有格外重要的意义。为进一步探索乳腺癌的发病机制提供了新的方向,也为乳腺癌的预防提供新的思路,因为携带MTHFR变异基因的个体,需要更多的叶酸才能维持细胞的正常功能,给这些人群补充叶酸可能有预防乳腺癌作用。MTHFR基因型与雌激素受体ER孕激素受体PR情况的分布频率的相关性为更好的研究叶酸与乳腺癌相关性提供了参考。