目的男性不育症已成为全球性的医学和社会学问题,其中以少弱精子症最为常见,亟需安全有效的治疗手段。西医治疗效果并不理想,中医药治疗有独特优势。广嗣育麟汤是以五子衍宗丸为基础加减化裁所创,临床应用治疗少弱精子症20余年,具有一定的疗效,尚无相关的研究。故本研究拟通过临床研究,观察评价广嗣育麟汤对肾精亏虚型男性不育少弱精子症患者的具体疗效;并设计动物实验观察广嗣育麟汤对生精障碍模型生精功能的影响,阐述其作用机制。方法临床研究:采用无病例对照研究观察方法,观察广嗣育麟汤对肾精亏虚型少弱精子症患者精液质量(精液量、液化程度、精子浓度、精子总数、精子总活率、前向运动精子百分率)、中医证候评分的影响。总疗程为90天,每日予广嗣育麟汤中药免煎颗粒进行治疗,观察矢点为治疗第0、30、60、90,每次访视均评价记录患者中医证候评分,治疗前后记录患者精液分析结果。临床研究期间,严格记录不良事件,每次访视时都进行脱落、剔除评估,并予以相关处理,最后统计所有数据结果。实验研究:1.采用雷公藤多苷灌胃4周建立大鼠生精障碍模型;2.造模成功后将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和中药干预组,每组12只,中药干预组采用广嗣育麟汤颗粒悬浆[10ml/kg]灌胃,空白对照组和模型对照组均采用去离子水灌胃,干预实验共计4周。3.观察指标:一般状况、体质量、脏器系数、精液质量、血清性激素水平、睾丸组织病理改变、睾丸组织及生精细胞超微结构的影响;采用免疫组织化学检测方法对大鼠睾丸组织进行Bax、Bcl-2蛋白含量的检测;采用western blot以及Real-Time PCR技术,检测c-kit、Oct4的蛋白及mRNA的表达。结果临床研究:纳入的50例受试者经过90天广嗣育麟汤的干预治疗后,其精液质量包括:液化状态、总活率(PR+NP)、精子浓度、总数等评价指标改善显著,具统计学意义(P<0.05或P<0.01);各项肾精亏虚型中医证候评分及总分,随着治疗的进行显著下降(P<0.05或P<0.01),整个观察期间未出现脱落、剔除病例,未见不良反应报告。实验研究:经广嗣育麟汤干预后中药干预组与模型对照组相比,大鼠的一般状态、附睾脏器系数、精液质量各项指标、卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)均有显著的改善,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);从病理形态及睾丸超微结构观察结果,中药干预组与模型对照组比较,生精小管结构、排列较正常,内含的生精细胞明显增多;变性、凋亡的生精细胞减少,内含的线粒体等细胞器明显增多;通过免疫组织化学的检测,中药干预组Bax、Bcl-2的蛋白含量,与模型组相比较,差异明显,具有显著的统计学意义(P<0.01)。结合western blot、Real-Time PCR检测结果,我们发现中药干预组大鼠睾丸的c-kit蛋白含量比模型对照组有所提高,相对应的mRNA表达量也呈明显的统计学差异(P<0.05);而Oct4的蛋白表达有一定程度的增高,mRNA表达量也较模型对照组有提升,但未见明显差异(P>0.05)。结论1.广嗣育麟汤可有效改善少弱精子症患者的精液质量,以及肾精亏虚中医证候评分指标,提高患者生精功能。2.广嗣育麟汤可以有效改善生精障碍模型大鼠一般状态、生殖器官脏器系数、精液质量、FSH、LH、E2、T,对睾丸组织的形态学和生精细胞的超微结构异常具有明显的修复作用,效果显著。3.广嗣育麟汤可以有效调控模型大鼠Bax、Bcl-2、c-kit蛋白及其mRNA的表达,具有明显的抑制生精细胞凋亡、促进生精细胞增殖作用,对Oct4蛋白及mRNA的表达作用不明显。综上,广嗣育麟汤可有效提高男性生精功能,临床疗效确切,其作用机制可能是通过改善血清内分泌环境,修复睾丸异常病理形态、超微结构,调控Bax、Bcl-2、c-kit蛋白的表达来实现。