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自然界中的植物经常会遭受低温、干旱和盐碱等不良条件造成的非生物胁迫，使其生长发育受到抑制，甚至导致植株死亡。CBF(C-repeat binding factor)是一类与逆境胁迫相关的转录因子，它能够识别并结合于低温、干旱和高盐胁迫应答有关基因启动子区域中的CRT／DRE(C-repeat／dehydration responsive element)顺式作用元件，启动下游抗逆基因的表达，从而在转录水平上调控多个抗逆基因。CRT／DRE元件位于受低温或干旱调控的RD／COR(responsive to dehydration／cold-regulated)基因的启动子区，通过与CBF转录因子结合参与非生物胁迫响应。因此，CBF类转录因子能够综合改良植物的抗逆性状，是迄今为止较为理想的抗逆基因工程候选基因。本文利用PCR技术首次从抗寒月季哈锦4号(Rosa chinensis)中分离并克隆了一个新的CBF基因(基因银行注册号码为EF583559)；同时，构建了该基因的植物表达载体，并通过农杆菌介导法将该基因转入烟草进行进一步的功能鉴定。主要研究结果如下：1．通过将GenBank上发表的几种植物的CBF同源基因进行比较在其保守区域设计一对兼并引物，采用PCR方法从抗寒月季中获得一大小为365bp的CBF基因中间片段，并进行了克隆，测序。2．在此中间片段区域设计了两对特异引物，采用反向PCR方法对月季CBF基因的5′和3′端的非编码区进行克隆，结果得到一长度约1400bp的片段，与中间片段拼接得到一大小为603bp的片段，此为预测的全长基因片段。3．在预测的全长区域的非编码区设计一对特异引物对月季基因组进行扩增，测序结果得到的序列在编码区内完全一致，证明预测全长序列即为月季CBF基因全长。4．应用DNAMAN软件将月季CBF基因全长与Genebank上发表的几种植物CBF基因进行氨基酸同源性比较，结果发现月季CBF基因具有AP2保守区和CBF家族的一系列特征，这说明我们已经成功地克隆了月季转录因子CBF基因。5．应用BamHⅠ和SacⅠ将质粒pBI121中的GUS基因切除，设计一对含有BamHⅠ和SacⅠ酶切位点的特异引物RcbfF、RcbfR，对月季基因组DNA进行扩增，将PCR产物酶切后插入到质粒pBI121中的GUS基因切除部位，获得月季CBF基因的植物表达载体pBI-CBF。6．采用农杆菌介导法将月季CBF基因的植物表达载体pBI-CBF转入烟草，通过对转基因烟草进行PCR检测，结果表明月季CBF基因已成功转入烟草。