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目的研究circ-ARHGEF28在乳腺癌组织、外周血液及细胞中的表达情况,评价其表达用于乳腺肿瘤临床诊断的可能性,预测与circ-ARHGEF28结合的miRNA,探究circ-ARHGEF28在乳腺癌增殖转移过程中的作用。方法收集2016年10月至2018年8月在宁夏医科大学总医院肿瘤外科确诊为乳腺癌的患者的癌组织及癌旁组织样本共20对;2017年8月至2018年9月乳腺癌患者血液样本113例。收集2017年10月至2018年9月宁夏医科大学总医院体检科健康体检人群血液样本50例作为对照。对所有患者临床资料和病理检查结果进行对比分析。通过circRNA芯片筛选乳腺癌组织与癌旁组织间差异表达的circRNA,发现546个高表达的circRNAs和1475个低表达的circRNAs(FC≥2,P<0.05),并用qRT-PCR验证了4个作为乳腺癌诊断和治疗的生物标志物的候选circRNA。采用t检验、曲线回归和接受者操作特性曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)等方法分析乳腺癌外周血中circ-ARHGEF28的表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。构建circ-ARHGEF28的过表达载体,并在乳腺癌细胞中验证其对肿瘤细胞增殖凋亡的作用;通过数据库筛选、预测和验证与circ-ARHGEF28潜在结合的miRNA。qRT-PCR验证过与circ-ARHGEF28结合miRNA的表达,联合GO分析和KEGG分析circ-ARHGEF28对乳腺癌细胞功能的影响。结果相对于癌旁组织,circ-ARHGEF28在乳腺癌组织中显著低表达;相对于健康人群,circ-ARHGEF28在乳腺癌患者外周血中显著低表达;相对于正常乳腺细胞系,circ-ARHGEF28在乳腺癌细胞中显著低表达。ROC曲线分析结果显示,circ-ARHGEF28的AUC为0.823,敏感性为82.3%,特异性为68.0%(P<0.01)。circ-ARHGEF28表达与肿瘤组织分级、雌激素受体ER阳性、肿瘤转移和TNM分期(P<0.05)密切相关。成功构建circ-ARHGEF28过表达载体,并成功转染到乳腺癌细胞中。CCK-8、细胞划痕、细胞周期和凋亡等实验确定该基因对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。高通量测序发现过表达circ-ARHGEF28后有28个上调的miRNA和5个下调的miRNA,并对这些差异表达的miRNAs进行靶基因预测以及靶基因的功能富集分析。GO分析差异表达的miRNA靶基因的生物学途径在细胞增殖的调控、细胞分化、WNT信号通路、细胞凋亡富集,KEGG分析靶基因在PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、TGF-beta信号通路、p53信号通路、Ras信号通路显著富集。根据数据库miRNA靶基因预测、通路富集分析以及研究文献进行筛选,最终确定12个差异显著的miRNA靶点,qRT-PCR验证后发现差异与测序结果相同。通过生物信息学预测了circ-ARHGEF28与miR-375具有结合位点,进一步分析发现miR-375主要与细胞增殖转移调控相关。结论circ-ARHGEF28在乳腺癌患者的外周血中的相对表达circ-ARHGEF28具有显著特异性,其与乳腺癌的发生密切相关,可作为一种新型的生物学标志物用于乳腺癌的诊断。circ-ARHGEF28与乳腺肿瘤的淋巴结转移以及组织病理分期、分型具有很大的相关性,可能作为乳腺癌分期、分型的外周血标志物。circ-ARHGEF28结合的miRNA的靶基因可以抑制乳腺肿瘤细胞增殖和分化,并诱导细胞凋亡,且circ-ARHGEF28可以作为ceRNA吸附miR-375,具有潜在调控乳腺癌增殖转移的功能。