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枣为我国主要果树产业之一,我国南方地区特别是湖南省枣资源十分丰富,生产发展迅速,枣果的综合利用是枣产业持续高效发展的重要保证。为促进枣功能成分的研究利用及我国南方枣果资源的开发利用,本文以湖南衡阳地区主要枣品种果实为试材,以枣黄酮及枣多糖含量为主要指标,在对不同枣品种黄酮、多糖含量分析的研究基础上,选取小米枣为试验材料,进行了枣黄酮的提取、分离纯化,枣黄酮、多糖及其复配物的体外抗氧化活性及其对Hacat细胞的抗氧化活性研究,主要研究结果如下:(1)测定了湖南衡阳地区7个枣品种果实中黄酮的含量,筛选出了黄酮含量高的枣品种。以鸡蛋枣、糖枣、药枣、小米枣、梨枣、酸枣等枣品种为试材,通过对不同枣品种果实黄酮含量的分析测定,发现供试品种的黄酮含量均值为0.493 mg/g,其中以小米枣、药枣的黄酮含量最高,分别为:0.606 mg/g、0.579 mg/g;梨枣、子代糖枣、母本糖枣的含量次之,分别为:0.522 mg/g、0.495 mg/g、0.466 mg/g;而酸枣和鸡蛋枣黄酮含量最低,仅为0.439 mg/g、0.344 mg/g。不同品种枣果实黄酮含量差异较大。(2)进行了小米枣黄酮的提取工艺研究。采用单因素实验与正交试验相结合得到了黄酮最佳的提取工艺参数。并在此最佳提取工艺条件下对小米枣黄酮、多糖进行了复合提取。结果表明,影响黄酮含量的4个主要单因素分别为超声功率、乙醇浓度、料液比、提取时间,正交实验得到小米枣黄酮的最佳超声提取工艺为:料液比1:16、乙醇体积分数60%、提取时间20 min、超声功率700 W;采用醇沉前加入三氯乙酸(TCA)脱蛋白的方法能有效去除混合液中的蛋白质,当加入TCA量为1.0%时,其对蛋白质的脱除效果最佳,此时蛋白质的脱除率为74.67%,同时能最大程度上保证多糖的保留;多糖经活性炭脱色及AB-8树脂除杂后的纯度可达76.84%。(3)进行了小米枣黄酮的分离纯化研究。研究了XDA-1、X-5、NKA-II、D201、AB-8共五种大孔吸附树脂对黄酮的纯化效果,并在此静态试验基础上筛选出三种树脂进行泄露曲线的研究。结果表明,不同树脂对黄酮的静态吸附能力大小依次为XDA-1>X-5>AB-8>NKA-II>D201,5种树脂对黄酮的静态解析能力大小依次为X-5>NKA-II>AB-8>XDA-1>D201,在此基础上初步筛选X-5、NKA-II及XDA-1这3种树脂进行进一步动态吸附与解析试验。结果表明X-5树脂对小米枣黄酮纯化效果最好,其动态吸附率与解析率分别达79.50%、99.53%,它对小米枣黄酮的适宜纯化条件为:上样液黄酮浓度为0.263 mg/mL、pH值为5.0、流速为2 BV/h;洗脱剂乙醇浓度为70%,洗脱液PH值为6.0。此条件下分离纯化得到的黄酮纯度为68.12%。(4)以还原力、对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、OH自由基的清除力作为评价指标,比较了三个品种枣中黄酮、多糖的含量及其体外抗氧化性;并用超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除力实验分别与加和法、等辐射分析法相结合研究了小米枣黄酮、多糖复配物的抗氧化协同作用类型及其强弱。结果表明,小米枣体外抗氧化性能明显强于糖枣与药枣,说明三个品种中以小米枣的开发利用价值最高;不同品种枣抗氧化性的强弱与黄酮及多糖含量均呈正相关;三个品种枣黄酮及多糖的还原力、清除羟基自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基的能力在实验浓度范围内均与浓度呈正相关,且均低于VC的抗氧化性;同一品种中枣黄酮的抗氧化性明显高于枣多糖。小米枣黄酮与多糖复配后的各种组合IC50mix值均小于IC50add值,且相互作用指数γ都小于1,证实两者间存在协同抗氧化作用,且此复配物对超氧阴离子自由基的协同作用强于DPPH自由基,复配物均在1:1配比时发挥出最佳抗氧化协同的作用。(5)以HaCat细胞为载体,研究了复配物、对照物(VC)对细胞氧化损伤进行预保护后的ROS水平及SOD水平的影响。结果表明,在实验浓度范围内,0.3、0.6 mg/mL的小米枣黄酮、多糖复配物及0.07 mg/mL的VC对Hacat细胞活性影响较小,在30umol/l的H2O2刺激下,细胞存活率为40%左右,较好造成了细胞氧化损伤模型;ROS及SOD活性检测的实验结果表明,加入H2O2后,细胞内的ROS水平明显升高、SOD水平明显降低,而加入复配物及VC后,细胞内ROS水平明显降低、SOD水平明显升高,表明复配物及VC对H2O2造成的氧化损伤均具有显著预保护作用,且小米枣黄酮、多糖复配物抗氧化作用强于VC,表明小米枣黄酮、多糖的复配物对HaCat细胞有较好的抗氧化作用。