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本研究以‘金冠’果实为试验材料,运用双向电泳技术和串联质谱技术对不同成熟阶段苹果果实进行差异蛋白质组学研究,通过对差异表达蛋白功能鉴定和蛋白图谱变化的生物信息学分析,深入探讨苹果果实成熟衰老的机理,为果实品质改良以及采后的品质调控提供理论依据。主要研究结果如下：1.建立了适合苹果果实总蛋白质分离的双向电泳体系。以改良的酚抽法提取总蛋白,用17 cm pH 4-7的IPG胶条进行等电聚焦电泳,聚焦时间为60000 VH,使用12%的SDS-PAGE进行垂直电泳分离蛋白,并采用胶体考马斯亮蓝G-250染色,获得了分辨率高、重复性好、蛋白点清晰、总蛋白点达400以上的双向电泳图谱；这些蛋白点主要分布在pH5～7,分子量15kDa～95kDa之间。该体系的建立为后续的苹果果实蛋白质组学的研究和分析奠定了基础。2.以‘金冠’苹果果实为试材,采用建立的双向电泳技术对苹果进行差异蛋白质组学的分析,结果显示不同成熟阶段和贮藏期‘金冠’果实的蛋白质图谱存在显著差异。用PDQuest软件对以双向电泳图谱进行分析获得了55个差异点,经串联质谱和数据库检索成功鉴定出53个2-fold以上的蛋白差异点。这些蛋白根据其功能可分为6类,包括胁迫反应和防御(49.0%)、能量和代谢(34.0%)、成熟和衰老(5.6%)、信号传导(3.8%)、细胞结构(3.8%)和蛋白合成(3.8%)；其中与胁迫反应和防御相关的蛋白所占比例最大,其次是能量和代谢中的蛋白。差异表达蛋白亚细胞定位结果显示,53个差异蛋白点主要位于细胞质(27个)、叶绿体(8个)、线粒体(4个)和细胞核(6个)。53个差异蛋白中参与糖酵解、磷酸戊糖途径、抗氧化系统、光合作用和细胞壁合成的蛋白,其表达量都呈下降趋势,尤其是在果实呼吸跃变高峰期及以后衰老阶段；另外,果实成熟期间涉及过敏原和细胞壁降解的蛋白大量表达,ACC氧化酶、抗坏血酸过氧化物酶以及脱落酸响应蛋白表达量变化与呼吸跃变相似,且ACC氧化酶活性上升先于呼吸跃变。