动物轮状病毒外壳抗原蛋白VP4基因转化苎麻的研究

来源 :华南热带农业大学 海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxb632552353
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轮状病毒(RotavirusRV)是引起各种幼龄动物病毒性腹泻的主要病原之一,流行发生时可造成畜牧业的重大经济损失.目前疫苗预防仍是控制此病的最佳选择,但常规苗存在死苗用量大且效果不好,活苗容易造成扩散和环境污染等缺点.转基因植物疫苗的研制,可以改变传统的疫苗接种方式和接种手段,而且可大大降低疫苗的生产成本,具有广阔的应用前景.该研究首先建立苎麻的再生体系,通过实验筛选出诱导愈伤的培养基R<,1>(MS+6-BA2.0mg/L+GA<,3>0.4mg/L+IAA0.2mg/L十蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L),芽分化培养基R<,2>(MS+6-BA2.0mg/L+GA<,3>0.4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L),生根培养基R<,3>(1/2MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L),为进一步植物转化打下基础.利用农杆菌介导的叶盆法转化苎麻,经卡那霉素培养基一系列抗性筛选,以直接出芽和愈伤诱导出芽两种方式得到了10株抗性苗.对所得到的抗性转化株进行了PCR、PCR-Southernblot、Southernblot检测,其中2株呈阳性,证明VP4基因已整合到苎麻基因组DNA中.
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