RNAⅢ分子是调控金黄色葡萄球菌毒力因子表达的关键分子。最新的研究认为，金葡菌分泌的RAP(RNAⅢ activating protein)能磷酸化其靶蛋白TRAP，从而激活RNAⅢ的转录。但是目前对RAP尚存在争议，因而RAP-TRAP通路仍需详尽的研究。参照文献报道的方法，我们实验室从金葡菌的培养上清中初步纯化到了能够激活RNAⅢ转录的成分(RAP样蛋白)，以这些粗纯成分为靶，从噬菌体随机展示肽库中筛选到了具有抑制RNAⅢ转录活性的结合肽序列R15。另外生物质谱鉴定了其中的蛋白条带。本课题的目的是在以上工作的基础上对RAP-TRAP毒力调节通路进行深入的研究。本研究首先利用大肠杆菌分别表达了生物质谱鉴定出的Beta-溶血素和PV白细胞毒素S蛋白(均去除了信号肽部分)。Northern Blot证实表达的这两种蛋白均不具有RNAⅢ激活活性。截留金葡菌培养上清，证实确实存在大于10kD的RNAⅢ激活成分。可能是RAP特殊的理化特性而使得对它的鉴定成为研究的瓶颈。接着，我们对作用肯定的TRAP蛋白进行了深入探讨，包括TRAP蛋白的细胞定位和TRAP细胞外结合蛋白的钓取、鉴定。与生物信息学预测结果不同，我们发现TRAP可能是细胞表面蛋白或者是分泌型表达的，它能够结合细胞外的自溶素蛋白。抗TRAP的多克隆抗体能够升高金葡菌自溶素的分泌水平。我们推测TRAP与自溶素蛋白可能会形成一条新的密度感应通路。本研究还进行了应用方面的尝试。利用原核表达系统，将R15肽与人IgG1的Fc片段进行了融合表达。MDBK细胞体外测毒模型证实正确复性的蛋白能够在一定程度上抑制金葡菌外毒素的分泌。本课题为进一步阐明金葡菌密度感应通路，研制抗金葡菌感染药物打下了良好的基础。