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肺癌是严重危害人类生命和健康的常见疾病，肺癌的死亡率已成为恶性肿瘤之首。目前以手术为主的综合治疗仍然是大多数肺癌治疗的主要治疗手段，放射治疗是有效的辅助治疗手段之一。肿瘤细胞的放射敏感性是影响放疗疗效的重要原因。榄香烯是从姜科植物温郁金中提取的非细胞毒性的具有抗癌活性的国家二类抗癌新药，对正常细胞及组织毒性非常低，副作用轻微，无明显肝、肾功能损害，不发生骨髓抑制，不同于一般的细胞毒性化疗药物。多项研究表明榄香烯对肿瘤有抗癌效应。
凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAp)是抑制细胞凋亡的重要成分。Livin是最新近发现的一种IAP家族成员，其组织分布具有明显的细胞选择性，特异性表达于人的胚胎组织以及大多数人类实体瘤细胞。在正常成人组织及外周血中无表达或低表达。与另一凋亡抑制基因Bcl-2的分布显著不同，且Livin的表达与患者的预后密切相关。Livin的表达还与细胞增殖有关。关于榄香烯对肿瘤细胞的放射增敏作用机制的研究，主要是细胞周期改变及凋亡方面。而对其是否影响抑制凋亡基因Livin表达从而实现放疗增敏作用未见报道。
本实验选用低细胞毒性的榄香烯乳联合照射，通过四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测β-榄香烯乳对A549细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时定量PCR技术(real-time PCR)检测细胞Livin和Caspase-3 mRNA相对表达量。观察榄香烯乳对肺腺癌A549细胞放射增敏作用及其对Livin和Caspase-3基因表达的影响。初步探讨榄香烯乳放射增敏的分子机制，为中药榄香烯作为放射增敏剂的临床应用提供理论依据。
目的：
本课题旨在研究β-榄香烯乳联合照射作用肺腺癌A549细胞，通过四氮唑蓝比色分析法、流式细胞仪观察细胞凋亡的变化和通过实时定量PCR技术(real-timePCR)检测凋亡抑制基因Livin的表达和Caspase-3的表达。初步探讨:1.β-榄香烯乳影响肺腺癌A549细胞凋亡和放疗增敏及不同浓度的放疗增敏效果如何;2.β-榄香烯乳联合照射对Livin基因表达的影响。分析其与放射增敏相关性，进一步探讨β-榄香烯放疗增敏的分子机制。为中药榄香烯作为放射增敏剂的临床应用提供理论依据。
方法：
体外培养人腺癌A549细胞，培养于F12K培养基中。用不同浓度的榄香烯乳(0、10、20、40、80、160、320、640μg/ml)进行干预。四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测β-榄香烯乳对A549细胞对数生长期的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为对照组(C)、照射组(R)、β-榄香烯乳组(0.1×IC50、0.2×IC50)及β-榄香烯乳联合照射组(0.1×IC50＋R、0.2×IC50＋R)，不同浓度的β-榄香烯乳处理细胞24h后照射，流式细胞仪检测细胞凋亡情况;应用实时定量PCR技术(real-time PCR)检测细胞中Livin mRNA和Caspase-3 mRNA的表达水平。
结果：
1 MTT试验结果表明:榄香烯各浓度组作用于细胞24h后抑制率(％)分别为5.93±4.42;16.23±3.09;22.86±4.92;37.43±3.17;58.41±3.02;74.32±5.60;88.93±8.78，MTT法测得β-榄香烯乳对A549细胞的IC50值为115μg/ml。
2.流式细胞仪检测对照组(C)、照射组(R)、β-榄香烯乳组(0.1×IC50、0.2×IC50)及β-榄香烯乳联合照射组(0.1×IC50＋R、0.2×IC50＋R)，不同浓度的β-榄香烯乳及照射处理A549细胞24h后凋亡率(％)分别为:6.83±0.20;12.72±0.05;9.13±0.07;9.82±0.12;13.51±0.44;14.63±0.1，β-榄香烯乳联合照射组细胞凋亡率明显高于单纯照射组及对照组(P＜0.05)。
3.实时定量PCR技术(real-time PCR)检测对照组(C)、照射组(R)、β-榄香烯乳组(0.1×IC50、0.2×IC50)及β-榄香烯乳联合照射组(0.1×IC50＋R、0.2×IC50＋R)，不同浓度的β-榄香烯乳处理细胞24h后细胞中LivinmRNA和Caspase-3 mRNA的相对表达量分别为:1.00±000;1.02±0.04;0.98±0.01;0.97±0.01;0.68±0.05;0.60±0.02和1.00±000;5.73±1.18;1.56±0.29;5.99±1.78;16.50±3.51;32.72±7.46，β-榄香烯乳联合照射组细胞Livin mRNA相对表达量较照射组明显下降（P＜0.01）;Caspase-3 mRNA相对表达量明显高于单纯照射组及β-榄香烯乳组(P＜0.05)。
结论：
1.β-榄香烯乳对A549细胞生长有明显的抑制作用，而且呈剂量依赖;
2.β-榄香烯乳联合照射时，β-榄香烯与射线对细胞凋亡的协同增效作用;
3.β-榄香烯乳联合照射下调Livin mRNA和上调Caspase-3 mRNA表达;
4.β-榄香烯乳对肺癌A549细胞具有放射增敏作用。