栅藻以其生长迅速,含脂量高,耐有机污染物,抗污水和高盐碱环境,特别是吸附重金属等特性,成为可再生能源的重要候选之一。采用有效手段以提高栅藻的生物量和油脂含量的积累成为热门研究内容。传统的方法主要是研究适宜栅藻生长的条件,如丰富的营养条件以利于生物量的积累；或采用缺氮(磷)、高光、高盐等胁迫条件促进栅藻积累油脂含量。基于其矛盾的条件,故传统的方法无法同时大量积累生物量和油脂含量。目前在分子水平上主要研究油脂积累的机理,利用关键酶基因的过量表达来促进油脂的积累。根据C源流向方向入手,通过阻断淀粉的合成,诱使C源流向油脂积累的方向进行,从而获得基因改造株油脂含量的大量积累。本论文分别从构建两步缺氮培养模式提高栅藻生物量和油脂产量；结合诱变,分析三氯生脂肪酸合成酶抑制剂和流式细胞仪分选对筛选高产油脂含量栅藻的效果；构建PUC19-ADP重组质粒,期获得ADP-葡糖焦磷酸化酶缺失藻株,研究基因改造株的油脂含量积累情况,具体如下：1.构建两步法培养同时大量积累栅藻的生物量和油脂含量。结果表明,采用二步法培养栅藻FACHB-14,于2000～2400lux低光强培养栅藻10d,其生物量平均值为0.957g/L,转高光强-缺氮培养8d后,其油脂含量为24.35%。与常规条件培养相比,生物量提高了35.74%,油脂含量提高了45.29%。转高光-缺氮培养,油脂含量与低光下培养相比提高了1倍。2.对栅藻进行筛选,探究栅藻对硝酸钠的需求情况,构建两步缺氮法培养方式。结果表明,培养至对数期的栅藻(起始接种OD为0.6),以20%的接种量接种于缺氮BG11培养基中,其起始硝酸钠含量为0.3g/L左右,于低光强下培养10d,其消耗的硝酸钠含量为0.3g/L左右。第一步缺氮处理,其剩余的硝酸钠成分足够栅藻积累生物量,第二步缺氮处理,栅藻大量积累油脂含量,最高油脂含量可达53.05±0.08%。与两步法相比,两步缺氮更有利于栅藻的生长和油脂积累,将筛选的较高产栅藻两步法培养后,其油脂积累为34.65%。同时GC/MS分析栅藻的脂肪酸成分,其油脂主要含C16:0, C18:1, C18:2和C18：3,其中C18：1含量最高,为28%～32%,C16：0次之,为23%左右,说明栅藻具有较高的生物柴油利用价值。3.结合诱变,探究三氯生脂肪酸合成酶抑制剂和流式细胞仪分选筛选较高产油脂含量的藻株。结果表明,三氯生对筛选较高产油脂栅藻有一定的作用,筛选得突变株的油脂含量相对野生型藻株,最多提高了10%。流式细胞分选技术能够准确、快速地筛选得较高产油脂的栅藻,初步筛选得,突变株的油脂含量比野生型提高了10.78%。4设计简并引物,构建重组质粒PUC19-ADP,利用基因枪手段导入重组质粒,构建栅藻ADP-葡糖焦磷酸化酶缺失藻株。