拟南芥光合作用高温敏感突变体的筛选

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高温是制约植物生长发育,影响作物产量的关键因子。而光合作用是作物产量形成的基础,但对高温敏感。因此,寻找和发现新的参与光合作用抗高温保护的叶绿体蛋白对采取有效措施提高作物抗热性,增加作物产量有重要理论意义。  我们利用正向遗传学的手段筛选拟南芥T-DNA插入突变体库,寻找光合作用高温敏感突变体。以培养皿作为种植工具,30℃作为筛选温度,突变表型及Fv/Fm值作为判定依据。筛选得到182、142和165三个突变体。以这三个突变体为材料进行一系列生理生化实验,获得以下实验结果:  1、在22℃温度下,这三个突变体突变体表型、Fv/Fm值、叶绿素荧光动力学曲线、P700氧化还原动力学曲线、PSⅠ和PSⅡ核心蛋白含量和WT无明显差异。30℃温度下,这三个突变体出现黄化表型,Fv/Fm值、PSⅠ和PSⅡ核心蛋白含量明显降低,光合功能受到明显损伤,而WT与22℃温度下相比,以上这些都没有明显差异。结果表明这三个突变体是光合作用高温敏感突变体。  2、高通量测序及DNA水平验证实验表明,182突变体T-DNA插入在gene5第一个外显子处,gene5编码一个定位在叶绿体的功能未知蛋白。142、165的基因定位正在进行中。
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