目的1.观察滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症患者应用GnRHa后所致围绝经期症状及患者血清性激素、CA-125等指标的影响,探讨滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症患者应用GnRHa后所致围绝经期症状的临床疗效。2.观察滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症模型小鼠应用GnRHa后,体质量和行为学的影响。3.探讨滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症模型小鼠应用GnRHa后,血清性激素（E₂、FSH、LH）的影响。4.研究滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症模型小鼠应用GnRHa后,脑组织单胺类神经递质（5-HT、NE、DA）的影响。5.观察滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症模型小鼠应用GnRHa后,其在位、异位内膜组织中免疫因子（TNF-α、IL-1、MMP-2、TIMP-2）的变化。方法1.采用随机对照的方法,选取盆腔子宫内膜异位症应用GnRHa治疗的患者40例,辨证属肾虚肝郁型,对照组和观察组各20例。两组患者均于保守性手术术后月经来潮的第1天给予GnRHa注射剂皮下注射,间隔28d重复注射,治疗共3次。观察组注射GnRHa注射剂治疗开始同时给予中药口服,共三个月;对照组单纯给予GnRHa注射剂,不用其他药物。在治疗前、治疗3个月后应用改良Kupperman评分法对两组患者的围绝经期症状进行评分;采用放射免疫法测定两组患者的血清雌二醇（E₂）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、血清CA-125,并进行比较,明确滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症患者应用GnRHa后所致围绝经期症状的预防、改善作用。2.采用腹腔注射法建立EMT小鼠模型,通过观察盆腹腔内异位灶位置、形态,并进行病理组织学验证以确定造模成功。实验分为正常组、疾病模型组、GnRHa组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。实验持续用药30天,以高、中、低剂量的滋水清肝理冲饮为干预治疗,其余组给予生理盐水治疗。在给药结束后第一天进行小鼠体重测定和旷场实验,比较各组间差异,研究滋水清肝理冲饮对EMT小鼠应用GnRHa后体质量和行为学的影响;采用放射免疫分析法测定小鼠血清中E₂、FSH、LH含量,探讨滋水清肝理冲饮对EMT小鼠应用GnRHa后血清E₂、LH、FSH的影响;采用ELISA法检测各组EMT小鼠应用促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）后脑组织单胺类神经递质5-HT、NE、DA的含量,并采用免疫组化法检测各组免疫因子（TNF-α、IL-1、MMP-2、TIMP-2）的表达,进而观察滋水清肝理冲饮对EMT小鼠应用GnRHa后脑组织单胺类神经递质的影响;并通过对其在位、异位内膜组织中免疫因子的检测（TNF-α、IL-1、MMP-2、TIMP-2）验证其应用的安全性。结果1.滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症患者应用GnRHa后所致围绝经期症状的临床研究（1）Kupperman评分:对照组患者应用GnRHa治疗3个月后,Kupperman评分均明显高于治疗前（P<0.01）,中药治疗后各组Kupperman评分低于对照组（P<0.01）。（2）激素水平:两组患者应用GnRHa治疗3个月后,血清E₂、LH、FSH的水平明显低于治疗前（P<0.01）,且观察组血清E₂的水平高于对照组（P<0.01）,FSH、LH无显著变化（P>0.05）。（3）CA125:两组患者治疗3个月后,患者血清CA125的水平明显低于治疗前（P<0.01）,且观察组血清CA125的水平低于对照组（P<0.01）。2.滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症应用GnRHa后所致围绝经期症状的实验研究（1）滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症小鼠应用GnRHa后体质量与行为学的影响:与疾病模型组相比较,GnRHa组体质量明显减轻（P<0.01）,与GnRHa组相比较,中药各剂量组体质量明显增加（P<0.01）;与疾病模型组相比较,GnRHa组小鼠潜伏期时间延长、跨越方格数减少、大便颗粒数明显增加（P<0.05）,与GnRHa组相比较,中药各剂量组潜伏期时间缩短、跨越方格数增加、站立次数增加、大便颗粒数减少、周边站立时间延长（P<0.01）;滋水清肝理冲饮各剂量组在疗效方面与浓度无明显相关性。（2）滋水清肝理冲饮对子宫内膜异位症小鼠应用GnRHa后血清性激素的影响:与疾病模型组相比较,GnRHa组小鼠血清FSH、LH含量升高,E₂含量下降（P<0.01）,与GnRHa组相比较,中药高、中剂量组FSH、LH含量下降,E₂含量升高（P<0.01）。（3）应用GnRHa后脑组织5-HT、NE、DA含量:与正常组相比,疾病模型组脑组织5-HT、NE、DA含量无统计学意义（P>0.05）;与疾病模型组相比,GnRHa组脑组织5-HT、NE、DA含量降低（P<0.05）;与GnRHa组相比,GnRHa+中药各个剂量组脑组织5-HT含量升高（P<0.01,P<0.05）,GnRHa+中药中、高剂量组脑组织NE、DA含量升高（P<0.01）。（4）应用GnRHa后在位、异位内膜组织中免疫因子的变化:与疾病模型组相比,应用GnRHa后在位、异位内膜组织TNF-α、IL-1、MMP-2表达降低,TIMP-2表达升高（P<0.01）;中药各组干预后未出现TNF-α、IL-1、MMP-2表达升高,TIMP-2表达降低的情况（P>0.05）。结论和意义1.临床研究结果滋水清肝理冲饮可以降低改良Kupperman评分,改善患者应用GnRHa后引起的类似围绝经期症状;增加患者体内血清E₂的水平,但对血清FSH、LH的水平作用不明显,且可以降低患者血清CA125水平,提高患者生活质量。为临床中解决子宫内膜异位症患者应用GnRHa后所致的围绝经期症状提供中医药治疗的思路与方法。2.实验研究结果从小鼠行为学表现,血清E₂、LH、FSH浓度水平结果及小鼠脑组织单胺类神经递质含量可见,GnRHa皮下注射后,可使EMT小鼠内分泌失调,出现类似围绝经期的症状,表现为焦虑/抑郁状态,体内FSH、LH含量升高,E₂含量下降,脑组织单胺类神经递质5-HT、NE、DA含量下降。中药滋水清肝理冲饮可改善EMT小鼠应用GnRHa后所出现的类围绝经期综合征的焦虑/抑郁状态;高、中剂量滋水清肝理冲饮可改善EMT小鼠应用GnRHa引起的体内性激素改变,可有效上调小鼠脑组织单胺类神经递质5-HT、NE、DA水平,调节GnRHa所致围绝经期相关神经递质的紊乱。通过子宫内膜异位症相关免疫因子的检测,发现滋水清肝理冲饮在改善小鼠类围绝经期症状的同时并未升高免疫因子的表达,说明其在改善GnRHa所致副反应的同时,不会导致子宫内膜异位症免疫因子升高,加重病情,安全性很好。为滋水清肝理冲饮对GnRHa影响子宫内膜异位症小鼠神经-内分泌-免疫网络的改善作用提供实验基础。