NKG2D是一种激活性受体，由同源二聚体构成，可表达于NK细胞、NKT细胞、CD8+αβT细胞和γδT细胞等多种免疫细胞表面，在固有免疫和适应性免疫应答中都起着非常重要的作用。近年来，UL16结合蛋白（ULBPs）作为一类新发现的人NKG2D配体家族日益受到关注。MULT1及其的剪切变体MULT1S，是ULBPs在小鼠的同类物，是小鼠的NKG2D配体。MULT1在正常的细胞膜上不表达或表达水平很低。在病理条件下，如在应激细胞、细菌或病毒感染细胞和肿瘤细胞，MULT1表达可上调，并通过与小鼠NKG2D受体结合，介导抗感染和肿瘤免疫。　　 MULT1/MULT1S是跨膜蛋白，其胞内段较长，除了通过NKG2D受体介导抗感染和肿瘤免疫外，是否还具有其它功能，如是否与胸腺的发育有关，是否有反向的信号转导的功能以及抗原提呈细胞上是否会表达MULT1/MULT1S作为危险信号或作为协同刺激分子发挥作用，MULT1和MULT1S两者在功能上有何区别等问题，目前文献尚无报道，有必要进一步的研究。因此，我们建立了MULT1/MULT1S的转基因小鼠模型，旨在通过过表达MULT1/MULT1S，比较两种转基因小鼠MULT1/MULT1S在组织中的表达及其对免疫系统的影响，以了解它们的免疫学功能。　　 本论文的第一部分主要是将构建的两个品系的转基因小鼠MULT1 Tg（3s和4s）及3个品系的MULT1S Tg（7s、10s和41s）与野生型C57BL/6小鼠交配，以产生F1代小鼠，并对F1代小鼠进行基因型和表型的鉴定，为筛选符合进一步研究需要的转基因小鼠提供依据。通过提取F1代转基因小鼠的基因组DNA进行基因组PCR及Southern blotting，以鉴定转基因小鼠的基因型。结果获得鉴定阳性的小鼠3s25只、4s13只、7s16只、10S42只和41s9只。对小鼠尾部组织和尾血mRNA的实时定量RT-PCR检测结果表明，3s和4s品系的MULT1Tg小鼠以及10s和41s品系的MULT1STg小鼠的基因转录产物阳性，可用于进行下一步研究。应用流式细胞分析以及免疫组化对MULT1Tg小鼠多种组织细胞进行初步分析的结果显示，MULT1主要表达在胸腺和小肠上皮间淋巴细胞，在脾细胞上基本不表达，且在小肠上皮间淋巴细胞表面的表达与小鼠的年龄有关。这提示下一步研究应主要开展胸腺、肠道及皮肤组织的相关研究。　　 本文的第二部分是有关人γδT细胞对类脂A的识别机制的研究（此部分与崔永春博士共同完成）。首先，应用流式细胞术、3H-TdR掺入实验和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester，CFSE）染色方法分别检测了在加与不加单核细胞来源的树突状细胞（monocyte-derived dendritic cell，moDC）的条件下，类脂A诱导人外周血来源的γδT细胞的增殖情况。结果显示，当moDC存在时，LA能诱导人类γδT细胞明显增殖，而无moDC存在时，基本上观察不到γδT细胞有增殖现象。这提示γδT细胞仅识别由moDC递呈的LA抗原。其次，抗CD1a、CD1b、CD1c、CD1d、TCRγδ、LA、MHCⅠ和MHCⅡ抗体对LA诱导的γδT细胞增殖的阻断实验结果表明，只有抗CD1b、CD1c、TCRγδ和LA的抗体能明显阻断LA诱导的γδT细胞增殖，而其它抗体没有此阻断效应；提示γδT细胞对LA的识别，是由moDC细胞提呈，由moDC细胞上的CD1b和CD1c分子介导，并依赖于TCRγδ的过程。最后，对LA反应性γδT细胞的TCRγδCDR3区基因序列的测定结果，未见有特异性保守序列，但发现优势取用J1片段，尚需对其结合特性作进一步验证。上述发现丰富了对γδT细胞识别脂类抗原机制的认识。