论文部分内容阅读
乙肝是一种严重危害人类健康的传染性疾病,目前抗乙肝病毒药物普遍存在一定副作用、耐药性和停药反弹等问题,因此,寻找结构新颖、具有新的作用机制的抗乙肝病毒药物意义重大。本文从民间用于治疗乙肝的中草药珠子草出发,研究珠子草中抗乙肝病毒活性成分,从珠子草活性石油醚部位分离出4种木脂素,经IR、MS、NMR 分析,确定其结构分别为 niranthin、nirtetralinB、hypophyllanthin 和phyllanthin。以HepG2 2.2.15细胞为细胞模型,对分离出的木脂素进行了细胞活性研究,结果表明niranthin、nirtetralin B具有显著抗乙肝病毒活性,其中 niranthin 对 HBsAg、HBeAg、HBV DNA 的 IC50 分别为 15.6 μM,25.1μM,17.9 μM;nirtetralin B 对 HBsAg、HBeAg、HBV DNA 的 IC50 分别为7.5μM,27.5μM,27.2 μM。以广西麻鸭为动物实验模型,连续灌胃给药14天后,高剂量组 niranthin和nirtetralin B对DHBV DNA的最高抑制率分别达90.87%和95.61%;另外,niranthin和nirtetralin B均可著地抑制HBsAg、HBeAg 的表达,提高 HBsAb、HBeAb、HBcAb 的含量,同时也能有效地降低血清中ALT、AST、TBil的活性。结果进一步证实niranthin和nirtetralinB具有显著的抗乙型肝炎及减轻肝脏病理性损伤的作用。接着,木文从具有抗乙肝病毒活性的木脂素niranthin、nirtetralinB出发,通过反向分子对接的方法探讨其潜在的抗乙肝作用靶点,为niranthin、nirtetralin B的抗乙肝作用机制提供了一定理论依据。在反向对接结果的基础上,选择了核心抗原30X8、人乙型肝炎病毒的pgRNA epsilon中的包装信号顶端茎环(ASL-HBVES)2K5Z为靶标,通过moe-dock分子对接技术,结合药物拼合原理,设计并合成了 28个具有C6-C3结构的新的木脂素类似物,以期获得活性更好、毒性更低的抗乙肝病毒活性化合物。本文所合成的目标产物的结构均经MS、NMR分析确认。以HepG2 2.2.15为细胞模型对合成的化合物进行了体外抗乙肝病毒活性测试,并进行了简单的构效关系分析。结果表明,大部分化合物都表现出了一定的抗乙肝病毒活性,其中化合物4c-3、4d-7,不但对HBsAg、HBeAg表现出了强于拉米夫定的抑制作用,对HBV DNA复制也有一定的抑制作用。