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[目的]通过检测SNI模型大鼠脊髓背角中Cdh8蛋白,背根神经节中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2蛋白及皮肤上皮细胞TRPA1蛋白表达的变化,探讨“三法三穴”推拿干预对周围神经损伤模型大鼠冷感觉超敏反应的影响。[方法]通过建立坐骨神经损伤大鼠模型,并对其进行“三法三穴”推拿干预,运用免疫组织化学、WesternBlot技术,对大鼠脊髓背角中Cdh8、背根神经节中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2以及足部皮肤的上皮细胞中TRPA1进行定性、定量研究。从脊髓背角神经元中Cdh8蛋白、背根节神经元细胞中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2蛋白及皮肤上皮细胞TRPA1蛋白表达的层面,结合冷板实验评价坐骨神经损伤模型大鼠冷感觉超敏性,探究“三法三穴”推拿干预对SNI大鼠模型中冷超敏反应的影响。[结果]1.冷板实验结果造模前1天各组大鼠患侧后足在冷板上的抬足次数无明显不同(P>0.05);推拿干预0次后,正常组与假手术组大鼠患侧后足抬足次数比较无明显不同(P>0.05);与假手术组比较,模型组和推拿干预组大鼠患侧后足抬足次数明显增多(P<0.01)。推拿干预20次后,与模型组比较,推拿干预组大鼠患侧后足在冷板上的抬足次数明显减少(P<0.01)。2.脊髓背角神经元Cdh8的表达结果免疫组化法与WesternBlot法检测脊髓背角神经元中Cdh8蛋白表达结果显示,推拿干预0天后,正常组与假手术组之间脊髓背角Cdh8的表达无明显不同(P>0.05);与假手术组比较,模型组脊髓背角Cdh8的表达明显增多(P<0.05)。推拿干预20天后,与模型组比较,推拿干预组脊髓背角Cdh8的表达有所减少,但变化不显著。3.背根神经节神经元中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8的表达结果免疫组化法与Western Blot法检测背根节神经元中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8蛋白表达结果显示,推拿干预0天,正常组与假手术组之间背根神经节中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8的表达无明显不同(P>0.05);模型组与假手术组比较,背根神经节中的TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8表达均显著增多(P<0.05)。推拿干预20天后,与模型组比较,推拿干预组背根神经节TRPA1、PAR2的表达均减少(P<0.05),而Cdh8、TRPM8蛋白减少不显著。4.皮肤上皮细胞TRPA1的表达结果免疫组化法检测皮肤上皮细胞TRPA1的表达结果显示,推拿干预0天后正常组与假手术组之间皮肤上皮细胞TRPA1的表达无明显不同(P>0.05);与假手术组比较,模型组和推拿干预组皮肤上皮细胞TRPA1蛋白表达均增多(P<0.05)。推拿干预20天后,推拿干预组与模型组比较,皮肤上皮细胞TRPA1表达明显减少(P<0.05)。WesternBlot未检测出结果。[结论]1.“三法三穴”推拿干预可显著改善SNI模型大鼠的冷感觉超敏反应。2.“三法三穴”推拿干预对SNI模型大鼠的冷感觉超敏反应的恢复机制与调节TRPA1冷感受器通路中相关蛋白有关。3.“三法三穴”推拿干预通过抑制背根神经节中TRPA1、PAR2及皮肤上皮细胞中TRPA1蛋白的表达起到促进冷感觉超敏反应恢复的作用。