不同品种猪肌肉脂肪酸组成的比较及相关功能基因的筛选与鉴定

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hyc20008
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本试验分析和比较了上市日龄的地方猪种蓝塘猪(9月龄)与瘦肉型猪种长白猪(6月龄)的肉质特性及脂肪酸组成,针对其肌肉脂肪酸组成表现出的品种间差异,采用基因芯片法首次筛选与脂肪酸组成相关的差异表达基因,并通过实时定量PCR验证,确定影响脂肪酸组成的候选基因。在此基础上,以硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)为目标基因,构建了猪SCD1过表达细胞模型,观察了过表达SCD1对肌细胞脂肪酸组成的影响。研究结果表明:   1.蓝塘猪体直长、体斜长、眼肌面积显著低于长白猪,背膘厚则显著高于长白猪(P<0.05)。常规肉质性状测定表明,蓝塘猪肌肉pH45min、pH24h、剪切力均显著低于长白猪,而肉色L*值显著高于长白猪(P<0.05),但感官与大理石纹评分两者间差异不显著(P>0.05);蓝塘猪与长白猪的背最长肌肌纤维类型差异不显著,但蓝塘猪背最长肌αw肌纤维密度显著高于长白猪,αr、αw肌纤维面积则显著低于长白猪(P<0.05)。蓝塘猪肌内脂肪含量显著高于长白猪(P<0.05)。   2.脂肪酸测定结果表明,蓝塘猪和长白猪背最长肌中的主要脂肪酸包括棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、花生四烯酸。棕榈油酸、油酸在蓝塘猪肌肉中的相对含量低于长白猪,而亚油酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸的相对含量则明显高于长白猪。蓝塘猪肌肉的总单不饱和脂肪酸相对含量低于长白猪,但其总多不饱和脂肪酸相对含量显著高于长白猪(P<0.05)。   3.背最长肌基因转录表达谱芯片数据显示,蓝塘猪与长白猪相比,差异基因/转录本有586个(上调289个,下调297个);表达水平改变5倍以上的上调基因22个,下调基因7个。通过芯片筛选脂肪酸组成相关基因,并经过定量PCR验证,最终确定在蓝塘猪显著上调的基因有FAS、LPIN1、PGC-1α、LPL、GPX1、CD36、SCD、ELOVL2、ACL、CYP3A29、DGAT2,显著下调的基因有IGF2、CACT、AOOL。   4.转染SCD1对肌细胞脂肪酸的相对含量有显著影响,其中肉豆蔻酸的相对含量显著降低,亚油酸、亚麻酸、二十碳烯酸、二十碳三烯酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸的相对含量显著提高(P<0.05)。转染SCD1细胞的饱和脂肪酸相对含量显著降低,而多不饱和脂肪酸相对含量显著提高(P<0.05)。
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