【摘 要】
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膜联蛋白(annexin)家族是一类钙磷脂结合蛋白超家族,存在于大多数真核生物细胞内,有着十分广泛且重要的生理功能,如参与细胞骨架运动、调节细胞生长、形成膜离子通道、参与细
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膜联蛋白(annexin)家族是一类钙磷脂结合蛋白超家族,存在于大多数真核生物细胞内,有着十分广泛且重要的生理功能,如参与细胞骨架运动、调节细胞生长、形成膜离子通道、参与细胞信号转导等.这类蛋白结构上具有明显特征:C端保守区大多由α螺旋组成,其中含有主要的Ca<2+>磷脂结合活性位点;N端为可变区,不同家族成员N端序列组成及长度各不相同.annexin B1是我们以免疫筛选法从猪囊尾蚴cDNA文库分离得到的新基因.将其核酸和氨基酸序列进行同源比较和分析,发现它实际上是一新的annexin家族成员.作为扁形动物门首次发现的annexin家族成员,研究annexin B1不仅可以了解其对猪囊尾蚴寄生、移行、生长、发育等生命活动的重要意义,为预防和治疗该类疾病提供新的药物靶点,而且可以为整个annexin家族的研究提供有意义的遗传及分子进化学资料.所以接下来我们构建了annexin B1的融合及非融合表达载体,在大肠杆菌中实现了高表达,利用亲和层析及离子交换层析技术纯化蛋白;采用Northern印迹和免疫组化方法研究annexin B1的阶段特异性表达和组织定位;采用计算机同源模建、定点及缺失突变、蛋白晶体培养等技术研究annexin B1结构与功能的关系;采用脂质体共沉淀、活化血小板结合、凋亡细胞结合实验以及建立血栓动物模型等方法研究annexin B1的主要生物学活性.
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