乳腺癌中Hedgehog信号通路相关蛋白的表达研究

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目的比较分析乳腺癌干细胞与其分化细胞中Hedgehog信号通路相关蛋白的表达及意义;探讨乳腺癌原发灶与其相应淋巴结转移灶中Hedgehog信号通路相关蛋白的表达及意义。方法选取乳腺浸润性导管癌新鲜标本30例,采用机械分离法将乳腺癌组织块制备成单细胞悬液,通过免疫磁珠两步法从中分离出乳腺癌干细胞(CD44+CD24-/low细胞)和乳腺癌分化细胞(CD24+)细胞和CD44-CD24-细胞),应用免疫细胞化学PV6000二步法检测两组细胞Hedgehog信号通路相关蛋白Shh、Ptch、Smo, Gli-1的表达情况;选取57例乳腺浸润性导管癌,均伴有腋窝淋巴结转移,应用PV6000免疫组化法检测其原发灶与淋巴结转移灶中Hedgehog信号通路相关蛋白的表达情况。结果(1)分选出的乳腺癌干细胞所占比例平均为2.85%,显微镜下,乳腺癌干细胞较之分化细胞并无明显形态学差异。(2)乳腺癌干细胞中Shh、Ptch、Smo、Gli-1的阳性表达率分别为83.3%(25/30)、73.3%(22/30)、76.7%(23/30)、76.7%(23/30);分化细胞中Shh、Ptch、 Smo,Gli-1的阳性表达率分别为53.3%(16/30)、40%(12/30)、40%(12/30)、23.3%(7/30)。(3) Shh、Ptch、Smo, Gli-1在乳腺癌干细胞中的表达明显高于其在分化细胞中的表达,其差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(4)乳腺癌原发癌灶中Shh、Ptch、Smo、 Gli-1的阳性率分别为91.2%(52/57)、86%(49/57)、91.2%(52/57)、71.9%(41/57):转移癌灶中Shh、Ptch、 Smo、Gli-1阳性率分别为82.5%(47/52)、91.2%(52/57)、75.4%(43/57)、22.8%(13/57)。(5)Shh和Ptch在乳腺原发癌灶及转移癌灶的表达比较均无统计学意义(P>0.05);Smo和Gli-1在乳腺原发癌和转移癌中的表达差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论(1)乳腺癌干细胞在肿瘤组织中所占的比例较少(2.85%),镜下与分化细胞无明显形态学差异。(2)Hedgehog信号通路相关蛋白在乳腺癌干细胞中的表达明显高于其分化细胞,推测Hedgehog信号通路相关蛋白在乳腺癌干细胞中处于活化状态,促进乳腺癌干细胞的更新和增殖,为临床靶向治疗提供新的思路。(3)Hedgehog信号通路相关蛋白Shh.Ptch在乳腺原发癌和淋巴结转移灶中均呈现高表达,表现为表达的一致性;而Smo,Gli-1蛋白乳腺原发癌中的表达明显高于淋巴结转移灶。尤其是Gli-1的蛋白的高表达可能在乳腺癌的侵袭和淋巴道转移过程中起到重要调控的作用。
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