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研究背景:糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是糖尿病病人常见的重要并发症之一,发病率在我国呈逐渐上升趋势,随着病情的进展而成为终末期肾脏病,因此,研究者们尽量想了解糖尿病肾病中肾小球损伤的机制,希望发现新的治疗策略。足细胞是高度终末分化的肾小球脏层上皮细胞,覆盖于肾小球基底膜(Glomerular basement membrane,GBM)外侧,在肾小球功能的调节中发挥着至关重要的作用。目前研究一致认为足细胞在DN的发病机制中发挥重要的作用。足细胞损伤表型改变的主要特征为细胞凋亡,体外和体内实验均证实高糖(HG)诱导足细胞凋亡,从而引起其损伤和数量的减少。但其具体机制目前仍然不甚清楚,因此,有必要对DN中足细胞凋亡所致的机制进一步深入研究,为临床预防和治疗DN提供理论依据。转录因子特异性蛋白-1(Sp1)属于SP/KLF转录因子家族成员之一,之前的研究数据显示:Sp1在人类包括甲状腺、胰腺、肝细胞、结直肠和胃癌各种肿瘤中高表达,这可能是肿瘤存在或发展的关键因素。最近,越来越多的证据表明Sp1与细胞凋亡有关,同时一些研究也证实Sp1还参与DN的发病机制。与此同时,有研究表明Sp1在维持足细胞完整性尤为重要,然而,HG是否激活Sp1在足细胞中的表达从而导致足细胞的凋亡还不清楚,本研究的目的是探讨高葡萄糖是否激活体外培养足细胞Sp1的表达以及其在高糖诱导足细胞凋亡中的可能机制。研究方法永生的小鼠足细胞在含有正常葡萄糖(NG)、高糖(HG)或Sp1 siRNA培养基中培养,用实时PCR、免疫印迹和免疫荧光测定足细胞中Sp1的表达。在使用Sp1 siRNA下调Sp1表达的情况下,通过流式细胞分析仪检测Sp1在高糖诱导足细胞凋亡中的作用。使用实时PCR、免疫印迹方法检测细胞凋亡基因Bax的mRNA和蛋白质的表达。统计分析采用SPSS17.0,数据用均值士标准差表示。多个组之间的比较使用单向方差分析与Bonferonni’s/Turkey检验或Dunnett’s T3检验。P<0.05认为有统计学差异。结果:在培养的足细胞中,高糖以时间和剂量依赖的方式刺激Sp1的表达。用Sp1 siRNA预处理后(50nm)明显降低Sp1的表达;同时,高糖引起的细胞凋亡效应也被明显抑制。此外,我们还发现HG也增加了足细胞中Bax的表达,这一效应同样能被Sp1 siRNA所下调。结论:Sp1/Bax信号通路在HG诱导足细胞凋亡中发挥作用,阻断Sp1/Bax信号通路可以减少高糖诱导的足细胞凋亡。