研究目的（1）用人工合成的人类β₃肾上腺素受体（β₃AR）细胞外第二环的表位肽段作为抗原,观察心力衰竭病人血清中抗β₃AR 自身抗体的分布及其在细胞水平对心肌细胞功能活动的影响;（2）选择抗β₃AR 细胞外第二环自身抗体阴性的大鼠建立心衰模型,观察模型形成前后大鼠血清中抗β₃AR 细胞外第二环自身抗体的变化情况;（3）采用人工合成的人类β₁肾上腺素受体（β₁AR）细胞外第二环的表位肽段作为抗原主动免疫大鼠,观察被免疫大鼠的心肌组织中有无凋亡发生,并探讨其可能的信号转导通路;（4）采用基因克隆表达技术合成β₁肾上腺素能受体细胞外第二环的功能肽段。研究方法（1）根据人类β₃AR 细胞外第二环第176～202 位氨基酸残基的序列人工合成抗原,采用ELISA 方法筛选心衰病人、正常人血清中抗β₃AR 自身抗体;（2）利用亲和层析法提纯抗β₃AR 自身抗体阳性的心衰病人血清中的IgGs;分离成年大鼠心肌细胞,利用动缘探测系统和双激发荧光光电倍增系统观察该提纯的IgGs 对成年大鼠心肌细胞的收缩效应及钙瞬变的影响;分离豚鼠心肌细胞,利用全细胞钳制技术观察该提纯的IgGs对豚鼠心肌细胞的L 型钙电流及钾电流的影响;利用细胞培养技术,观察该提纯的IgGs 对乳鼠心肌细胞跳动频率的影响,并观察该变时效应有无脱敏现象。（3）选用抗β₃AR 自身抗体阴性的的健康雄性Wistar 大鼠缩窄腹主动脉建立心衰模型,检测该模型形成后大鼠血清中有无产生抗β₃AR 自身抗体,并采用上述方法观察该抗体的生物学效应。（4）选用抗β₁AR 自身抗体阴性的健康Wistar 大鼠95 只,分成两组:对照组（n=30）和β₁AR 免疫组（n=65）;根据人β₁AR 细胞外第二环第197～222 位氨基酸残基的序列合成抗原进行免疫;定期测定两组大鼠的在体心功能;用TUNEL（荧光显色/酶化学反应显色）和琼脂糖凝胶电泳检测心肌组织中有无凋亡的发生;采用比色法检测心肌组织中caspase-3、caspase-8 和caspase-9 的活性。（5）设计大鼠β₁AR 细胞外第二环肽段基因的特异性引物,从大鼠心脏组织中提取