银杏叶多糖的分离纯化和降血糖功效研究

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银杏叶是一类蕴藏量相等大的潜在资源,主要包括黄酮类、萜类、生物碱、多糖类、酚类、氨基酸、微量元素等有多种有效成分,具有广阔的开发前景。我国银杏叶产量占世界产量的70%左右,本文从银杏叶多糖的提取、分离入手,对其性质和降血糖作用进行了研究。通过对苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法测定银杏叶多糖含量,结果表明,蒽酮硫酸法的吸光度Y和多糖含量X之间的回归方程为Y=0.0076X+0.0071,相关系数R~2= 0.9995,回收率为100.26%,精密度为0.069,相对误差为0.51%。结果比苯酚硫酸法好,因而可认为蒽酮硫酸法是测定银杏叶多糖含量较为理想的方法,在分离纯化银杏叶多糖时可用于对部分收集的多糖进行跟踪检测。运用单因素和正交实验确定了银杏叶多糖的最佳提取工艺条件:破碎程度60目,温度100℃,时间4小时,料水比1: 30。通过sevag法、三氯乙酸法、蛋白质等电法沉淀法几种去蛋白方法的比较得出最佳的去蛋白方法和条件为用sevag法,氯仿与正丁醇比例为4: 1,样液与sevag的体积比3: 1。通过离子交换柱DEAE纤维素和Sephacryl-200分离纯化多糖,得多糖制品,并用高效液相和气相色谱以及红外对其进行产品分析,得多糖纯度大约为94%以上,相对分子量为12749,含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖。其中鼠李糖:阿拉伯糖:甘露糖:葡萄糖:半乳糖=0.236 : 0.2104 : 0.1608 : 0.078 : 0.315。通过红外光谱对银杏叶多糖的分析,含有α-D葡萄吡喃糖。动物实验结果表明,银杏叶多糖对正常小鼠没有显著影响,不会使正常小鼠血糖降低,对正常小鼠的糖耐量也无影响。对糖尿病小鼠的降血糖作用显著。通过不同剂量银杏叶多糖对糖尿病小鼠的降糖效果的影响可知,低,中,高剂量中,0.8g/kg·d的中剂量组效果最好,且能减缓糖尿病小鼠的体重下降趋势。
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