小鹅瘟是雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性传染病,由鹅细小病毒即小鹅瘟病毒(GPV)引起。本病主要侵害4～30日龄雏鹅,具有传染快,死亡率高,危害大的特点。生产上主要依靠免疫种鹅以提高雏鹅母源抗体水平,或1日龄雏鹅注射高免血清来控制本病的大规模流行,但临床上每年仍有约20%雏鹅发病,主要用抗小鹅瘟血清等治疗,虽有较好疗效,但易传播其他传染性疾病且生产成本巨大。有科研人员探索用含板蓝根的中药复方防治本病,亦取得了较好效果。而众多文献则报道板蓝根及其多糖在细胞或胚内,对流感病毒、猪细小病毒和新城疫病毒等十多种病毒均有撷抗作用。鉴此,课题组提出了板蓝根多糖抗小鹅瘟病毒的作用研究。本项研究以板蓝根多糖(IRPS)和板蓝根煎液为研究对象,在鹅胚、鹅胚成纤维细胞和人工感染雏鹅3个水平上,研究其抗GPV的作用效果及机理,为探寻IRPS抗GPV的作用积累科学的实验数据。具体试验研究分以下三个方面:试验一、IRPS对GPV在鹅胚中繁殖的影响在鹅胚内作IRPS直接杀毒和阻断感染试验,对鹅胚尿囊液中GPV含量、鹅胚存活时间、存活率、病变和病毒含量进行测定。结果显示:40μg/胚IRPS阻断感染组,GPV接种72 h后ELISA检测为阳性的尿囊液最高稀释倍数是23;鹅胚平均存活时间为192 h;存活率为6/6;胚体肉眼观察未见病变;切片镜检:肝、肾轻度淤血和细胞变性,心、脑轻度淤血和水肿;免疫组化检测:肝、肾内GPV表达抗原为弱阳性,心、脑内为阴性。而攻毒对照组尿囊液GPV阳性的最高稀释倍数为28;鹅胚存活时间138 h;存活率0/6;胚体严重萎缩、出血、水肿,心、肝、脑、肾等组织均呈现细胞碎裂、坏死,组织内GPV表达抗原全为强阳性。两者比较,各指标具有极显著差异。表明在鹅胚内IRPS具有极强的阻断GPV感染、增殖和保护胚体组织器官免受其损伤的作用。试验二、IRPS抗GPV的体外作用研究为了探索IRPS在GEF上的抗GPV的作用,在培育GPV细胞适应株和测定IRPS对GEF生长影响的基础上,采用MTT法研究IRPS对GPV的阻断感染、抑制增殖及直接杀灭作用。结果表明:培育的细胞适应株GPVy06-11病毒能引起GEF明显病变;100～1000μg/mL的IRPS能促进GEF增殖;100～750μg/mL的IRPS对GPV有显著的阻断感染和直接杀灭作用,400～750μg/mL的IRPS有抑制病毒增殖的作用。试验三、板蓝根及其多糖防治实验性小鹅瘟病的研究为了探讨板蓝根水煎液及其多糖溶液在雏鹅体内是否具有抗GPV的作用,在板蓝根水提液多糖含量测定、鹅胚源GPVyz株对雏鹅的LD50毒力测定的基础上,进行人工感染小鹅瘟病毒的分组防治试验,观察其存活时间、存活率、组织病变和病毒含量等指标。结果显示:仅在死亡鹅的平均存活时间方面,IRPS防治组为130.7 h、板蓝根煎液组为150.0 h,与阴性药物组的118.8 h有显著差异。表明在人工攻毒的雏鹅体内,板蓝根煎液或IRPS溶液仅能减慢GPV在病雏体内的复制和各组织间的转移速度,但不能完全抑制病毒的复制和致病性。综上所述,本研究结果表明,IRPS在鹅胚及其成纤维细胞上对GPVy06毒株具有明显的撷抗作用,其作用机理主要是阻断GPV感染、增殖。但在人工攻毒感染的雏鹅体内,板蓝根及其多糖仅能减慢GPV在病雏体内的复制和各组织间的转移速度,不能完全抑制病毒的复制及致病作用。