本研究应用体外培养方法解离下来的猪附红细胞体经超声波裂解制备成猪附红细胞体抗原,进行Sephadex G-200柱层析,经SDS-PAGE电泳检测,获得分子量为58kDa、29kDa的特异性抗原,Western-blot印迹分析,该抗原具有较好的反应原性。猪附红细胞体提纯抗原经无菌PBS溶液稀释制备成不同浓度的猪附红细胞体抗原;免疫BABL/C小鼠后,筛选出猪附红细胞体抗原的最佳免疫浓度为3 mg/mL。将猪附红细胞体抗原与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂等混合,免疫BABL/c小鼠,同时设PBS对照组,应用间接ELISA检测抗体水平,比较不同佐剂猪附红细胞体疫苗的免疫效果。结果表明,除PBS组外,其余各组在第二次免疫一周后即有特异性抗体产生;弗氏佐剂组和白油佐剂组在第二次免疫后一周抗体水平略高于铝胶佐剂组、明矾佐剂组及无佐剂组,差异显著(p＜0.05);第三次免疫后第二周白油佐剂组的抗体水平最高,弗氏佐剂组的抗体水平接近于白油佐剂组,与对照组差异极显著(p＜0.01);其余各组均与对照组差异显著(p＜0.05);至此,试验组的抗体水平达到高峰以后逐步下降,白油佐剂组与弗氏佐剂组的抗体水平下降较慢,与其他组均存在显著差异(p＜0.05)。结果表明白油佐剂组与抗原混合应用的免疫效果最好。同时对免疫BABL/c小鼠进行CD4.+和CD8~+的比值检测,评价亚单位疫苗对BABL/c小鼠的细胞免疫水平。结果表明,白油佐剂组、弗氏佐剂组、铝胶佐剂组、明矾佐剂组的淋巴细胞百分数均显著高于PBS对照组(p＜0.01),其中白油佐剂组、弗氏佐剂组与无佐剂组之间差异极显著(p＜0.01),铝胶佐剂组、明矾佐剂组与无佐剂组之间差异显著(p＜0.05),铝胶佐剂组的淋巴细胞百分数略高于明矾佐剂组,但差异不显著。为测定亚单位疫苗对动物机体的免疫保护作用,对部分免疫BABL/c小鼠在第三次免疫一周以后进行攻毒试验,PCR方法检测BABL/c小鼠感染猪附红细胞体情况。结果显示,注射疫苗的实验组BABL/c小鼠在第一次攻毒后第37d检测、到猪附红细胞体,而对照组BABL/c小鼠在第一次攻毒后的第3d则检测到猪附红细胞体。本研究为猪附红细胞体亚单位疫苗的应用研究及该病的防治奠定了基础。