目的：建立SYBR-Green1荧光定量PCR(SYBR-Green1 qPCR)检测弓形虫的方法，并进行实验室方法学评价。方法：常规PCR扩增弓形虫RH株高度保守的B1基因部分序列，经TA克隆后转化入大肠杆菌JM109中。提取重组质粒PCR及测序鉴定后，作为阳性模板建立SYBR-Green1荧光定量PCR标准曲线，并做重复性试验，对桂弓、B36虫株及恶性疟原虫、血吸虫基因组DNA、30份孕产妇标本、200份无偿献血者标本进行检测。结果：用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系，熔解曲线特异，相关系数0.997，平均试验间变异系数0.81％，检测桂弓、B36虫株均为阳性，而检测血吸虫、恶性疟原虫基因组DNA均为阴性：孕产妇检测阳性率16.7％，平均拷贝数为1.05×10~5／μl；对无偿献血者检测均为阴性。结论：成功建立了检测弓形虫B1基因的SYBR-Green1荧光定量PCR方法，较常规PCR技术更快捷、敏感、准确，适合临床实验室及无偿献血者的筛查应用。