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研究背景与目的胃癌是临床上常见的消化道恶性肿瘤,发病率和死亡率较高,虽然以手术为主的综合治疗手段不断完善,但术后复发转移仍是影响胃癌患者长期生存的主要原因。因此,寻找有效的复发转移预测因子是临床亟待解决的问题。近年来,迅速发展的肿瘤干细胞(CSCs)理论认为肿瘤组织中存在一小群能够自我更新、分化并驱动肿瘤生长的干细胞,他们是肿瘤术后复发转移的主要根源。Nanog作为肿瘤干细胞多潜能性维持因子在干细胞干性调控方面具有重要意义。E-cadherin是一种广泛分布于上皮细胞的钙依赖性糖蛋白,因其可通过促进同型细胞间的黏附使癌细胞间保持密切接触,从而抑制肿瘤侵袭转移。肿瘤复发转移的整个过程离不开肿瘤微环境,Periostin(PN,骨膜蛋白)作为调控肿瘤微环境的重要蛋白在促进肿瘤侵袭及维持肿瘤细胞生长方面的作用还不清楚。因此,本课题将通过RT-PCR法检测Nanog、 E-cadherin及Periostin在胃癌组织和癌旁组织中的表达并探讨其对胃癌术后复发转移的预测作用。材料与方法采用RT-PCR法检测49例经手术切除的胃癌组织及癌旁组织中Nanog、E-cadherin和PN的表达水平。分析Nanog、 E-cadherin、PN的表达同患者性别、年龄、肿瘤的发生部位、分化程度、浸润深度、淋巴结浸润和复发转移的关系;并探讨三个指标表达情况同患者无病生存时间(DFS)的关系。结果(1) Nanog在胃癌组织中阳性表达率为45%(22/49),明显高于癌旁组织8%(4/49),差异有统计学意义(p=0.000);Nanog表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、浸润深度、淋巴结浸润无关,与分化程度及复发转移有关(p值分别为0.038、0.013);胃癌组织中Nanog阳性表达者中位DFS为9个月,阴性表达者中位DFS为15个月,差异有统计学意义(p=0.003)。(2) E-cadherin在胃癌组织中阳性表达率为39%(19/49),明显低于癌旁组织82%(40/49),差异有统计学意义(p=0.000);E-cad表达与胃癌浸润深度、淋巴结浸润及复发转移有关(p值分别为0.020、0.022、0.049);胃癌组织中E-cadherin阳性表达者中位DFS为23个月,阴性表达者中位DFS为10个月,差异有统计学意义(p=0.043)。(3) PN在胃癌组织中阳性表达率为55%(27/49),明显高于癌旁组织24%(12/49),差异有统计学意义(p=0.002);PN表达与淋巴结浸润及复发转移有关(p值分别为0.016、0.040);胃癌组织中PN阳性表达者中位DFS为10个月,阴性表达者中位DFS为16个月,差异有统计学意义(p=0.013)。(4)联合分析Nanog、PN在胃癌组织中的表达,其中双阳组16例,单阳组17例,双阴组16例。三组的表达与复发转移差异有统计学意义(p=0.019),且二者均阳性表达者其术后中位DFS为8个月,明显短于任意一项阳性者(中位DFS为13个月),而二者均阴性表达者其术后DFS最长(中位DFS为25个月),差异具有统计学意义(p=0.001)。(5)联合分析Nanog、E-cad在胃癌组织中的表达,Nanog阴性E-cad阳性组的患者中位DFS最长,可达23个月。而Nanog阳性E-cad阴性组的患者中位DFS最短,仅为7个月。各组间DFS的差异有统计学意义(p=0.000)。(6)联合分析PN、E-cad在胃癌组织中的表达,PN阴性E-cad阳性组的中位DFS可达到26个月。而PN阳性E-cad阴性组的中位DFS仅为9.5个月。各组间DFS的差异有统计学意义(p=0.026)。(7) Sperman相关性分析显示49例胃癌组织中,Nanog表达与E-cad无相关性(p>0.05);Nanog表达与PN呈正相关性(p=0.025,r=0.320);PN与E-cad表达呈负相关性(p=0.001,r=-0.461)。(8)多因素分析显示:PN是胃癌术后复发转移的独立预后因素(p=0.027)。结论(1)Nanog、PN在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织,而E-cadherin在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织。Nanog表达与胃癌分化程度及复发转移有关,E-cadherin表达与胃癌浸润深度、淋巴结浸润及复发转移相关,PN表达与淋巴结浸润及复发转移有关。(2)该三项指标均与胃癌术后DFS相关,Nanog、PN可作为胃癌患者不良预后的监测指标,且二者联合检测有利于预测胃癌术后复发转移。E-cadherin有希望成为胃癌患者预后良好的监测指标。(3)相关性分析显示,PN与Nanog表达呈正相关,PN与E-cadherin呈负相关。提示在胃癌中PN与Nanog、E-cadherin相互作用,其具体机制有待进一步研究。(4)多因素分析提示PN可能成为胃癌术后复发转移的独立预测因子,指导临床监测术后的复发转移。