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钩吻(Gelsemium)别名断肠草,是马钱科植物葫蔓藤的全草。研究表明其具有免疫调节、抗炎镇痛、抗肿瘤等药理作用,但毒性强,内服能致死,限制了其临床应用。但钩吻能促进猪和羊的生长,在兽医临床上广泛应用添加。钩吻的化学成分复杂,采用不同方法提取后,其化学成分不一样,因此,提取物的药理作用变化,其代谢也会影响其作用。目的：本试验通过比较三种不同的钩吻粗提物(钩吻醇提物、水提物以及酸水提取物)对体外培养的人肝癌细胞(HepG2)的毒性作用,并通过加入肝S9与NADPH和细胞的共孵育来进一步探讨三种粗提物对细胞毒性的影响,以此研究三种钩吻提取物对体外培养的细胞毒性作用的差异,以及其是否存在代谢活化或者代谢失活。为今后更深入地研究钩吻的毒性与代谢奠定基础。方法：用不同浓度的三种钩吻粗提物孵育HepG2细胞24h后,CCK8法检测三种钩吻粗提物对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率,通过检测细胞内活性氧ROS、线粒体膜电位△Ψ、细胞内钙离子浓度Ca2+探究其对于HepG2细胞产生抑制作用的机制。同时,用三种钩吻粗提物与肝S9孵育组和三种粗提物与肝S9和NADPH孵育进行比较研究,进一步阐明钩吻对HepG2细胞抑制作用机制和肝药酶代谢的关系。结果：三种钩吻粗提物呈剂量依赖性抑制体外培养的HepG2细胞增值,并且能够诱导HepG2细胞凋亡。同时细胞内ROS和钙离子浓度也随着浓度地升高而增加,线粒体膜电位在三种钩吻粗提物的作用下呈现浓度依赖性降低。肝S9和NADPH的加入能够减轻钩吻对HepG2细胞活性的抑制,同时对细胞内ROS、钙离子浓度以及线粒体膜电位的影响都较钩吻单独作用细胞时产生的影响小。结论：三种钩吻粗提物对HepG2细胞毒性作用从大到小依次是：醇提物、水提物和酸水提取物,肝S9和NADPH的加入能够引起钩吻的代谢失活。