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研究目的:脑创伤(traumatic brain injury,TBI)因其高致残、高致死的特点,严重危害着人类的健康,已成为全世界第三大疾病。近年来,一种与反复轻度脑创伤(repetitive mild traumatic brain injury,rmTBI)相关的神经退行性疾病——慢性创伤性脑病(chronic traumatic encephalopathy,CTE)得到了研究学者们越来越多的关注,该疾病常见于退伍士兵、橄榄球运动员、拳击选手等。现阶段,相关研究主要集中于CTE相关的rmTBI模型中行为学和病理学的研究,而CTE相关的rmTBI模型的免疫学研究尚未报道,属于目前科学研究的空白领域。本实验首先通过改进的神经功能评分(mNSS)和Morris水迷宫实验(MWM),证实rmTBI大鼠模型存在长时程的神经行为学异常和认知功能障碍,其次运用免疫荧光术和流式细胞术初步研究rmTBI大鼠模型中T细胞亚群(CD3~+T细胞、CD3~+CD4+T细胞、CD3~+CD8+T细胞)以及小胶质细胞表型(M1型小胶质细胞、M2型小胶质细胞)的变化规律,以了解CTE相关rmTBI大鼠模型中长时程免疫反应的变化规律,为进一步探索其免疫机制奠定实验基础,同时也为进一步探讨CTE相关的新颖免疫防治策略提供理论依据。研究方法:1.mNSS和MWM评价大鼠rmTBI伤后42d内的神经行为学功能和认知学习水平。2.应用流式细胞仪检测大鼠rmTBI伤后脑组织以及外周血中1d、3d、7d、14d、28d以及42d的T细胞亚群(主要集中在CD3~+T细胞、CD3~+CD4+T细胞、CD3~+CD8+T细胞)的变化规律。3.应用免疫荧光、流式细胞仪检测大鼠rmTBI伤后脑组织中7d、14d、28d及42d的小胶质细胞表型(M1型小胶质细胞、M2型小胶质细胞)的变化规律。结果:1.(1)mNSS表明,大鼠rmTBI伤后42d内存在明显的神经行为学异常。(2)MWM表明,大鼠rmTBI伤后存在长时程的认知功能障碍。2.(1)大鼠rmTBI伤后,存在长时程中枢免疫功能的异常,T细胞(CD3~+T细胞)百分率呈双峰型趋势,在7d和42d显著上升。T细胞中CD3~+CD4+T细胞的百分率在伤后7d上升,之后持续下降。T细胞中CD3~+CD8+T细胞的变化趋势恰与CD3~+CD4+T细胞的变化趋势相反。(2)外周免疫中,T细胞(CD3~+T细胞)的百分率在伤后7d、14d均有显著的上升,在伤后28d、42d均有显著的下降。T细胞中CD3~+CD4+T细胞的百分率在伤后持续下降。T细胞中CD3~+CD8+T细胞的百分率在伤后7d至28d逐渐上升,随后42d下降。3.(1)小胶质细胞(Iba-l阳性)在伤后7d和42d显著增加。(2)小胶质细胞(Iba-l阳性)中,CD86+/CD11b+M1型小胶质细胞在伤后42d表达显著增加,CD206+/CD11b+M2型小胶质细胞在伤后7d表达显著增加。结论:1.大鼠rmTBI伤后,存在长时程的神经行为学异常和认知功能障碍。2.大鼠rmTBI伤后,存在中枢和外周免疫功能的紊乱,其中,慢性期的外周免疫抑制可能对rmTBI神经预后产生影响。3.大鼠rmTBI伤后,小胶质细胞表型存在一定的变化规律,急性期以M2型小胶质细胞为主,慢性期以M1型小胶质细胞为主,M1/M2型小胶质细胞的差异表达可能对rmTBI的继发性损伤产生影响。