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目的:本研究旨在探究乳酸脱氢酶A(LDHA)对脑胶质瘤细胞中脂质合成的影响及机制,为进一步靶向肿瘤代谢的临床治疗策略提供理论依据。方法:首先应用生物信息学方法分析LDHA在脑胶质瘤中的表达模式及临床意义,同时分析LDHA与脑胶质瘤脂质合成的相关性。随后应用Western blot分析脑胶质瘤细胞内LDHA对脂质合成及线粒体自噬通路、AMPK信号通路的调控作用。最后应用特异性荧光染色检测脑胶质瘤细胞内线粒体ROS及线粒体膜电位的变化。结果:临床数据分析结果显示脑胶质瘤中LDHA的mRNA表达水平高于正常脑组织;LDHA高表达组病人的总体生存期较低;人蛋白数据库分析结果显示恶性脑胶质瘤中LDHA蛋白表达水平明显高于低等级胶质瘤及正常脑组织;相关性分析结果显示,LDHA与ACLY的表达呈正相关,与ACSS2的表达无明显相关性。常氧及缺氧条件下的PN型GBM细胞SW1783和U251MG中LDHA及ME2的蛋白表达均处于较低水平,而MES型GBM细胞U87MG及LN229中LDHA与ME2的蛋白表达均处于较高水平,与常氧条件相比,缺氧条件下SW1783和U251MG细胞中脂质合成指标FASN、SCD1、ACLY和ACSS2显著增加,而U87MG及LN229细胞中FASN、SCD1、ACLY和ACSS2则无明显变化,均处于较高水平;U87MG细胞中LDHA、ME2及p-ACLY随着缺氧时间的增加蛋白表达逐渐增加;常氧及缺氧条件下在U87MG细胞中干扰LDHA后ME2的蛋白表达水平降低且ACLY的磷酸化水平降低,表明LDHA能够促进ACLY的激活,即LDHA能够促进线粒体柠檬酸途径来源的乙酰辅酶A的合成;常氧条件下干扰LDHA后,ME2及p-ACLY的水平随外源性加入的乳酸盐浓度的增加而增加,表明糖酵解经LDHA催化的终产物乳酸能够活化ACLY,促进线粒体柠檬酸途径来源的乙酰辅酶A的合成。在U87MG及LN229细胞中干扰LDHA的表达后,线粒体ROS的产生增加,线粒体膜电位显著降低,线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、p-ubiquitin、p62、Optineurin、BNIP3、BNIP3L和LC3B的表达增高,p-AMPK及p-TSC2蛋白的表达水平升高,p-Raptor及p-mTOR蛋白的表达水平降低,表明LDHA能够通过AMPK信号通路影响MES型GBM细胞的线粒体自噬。结论:脑胶质瘤中LDHA明显高表达,与患者生存期呈负相关,且LDHA与ACLY的表达呈正相关。缺氧条件下PN型GBM细胞内的脂质合成功能活跃,MES型GBM细胞内LDHA能够促进线粒体柠檬酸途径的脂质合成。此外,我们证明了LDHA通过AMPK信号通路抑制人脑胶质瘤细胞线粒体自噬。本研究探明了LDHA对MES型GBM细胞线粒体柠檬酸途径的脂质合成的影响,及其通过影响AMPK信号通路对MES型GBM细胞线粒体自噬的作用,为进一步靶向肿瘤代谢的临床治疗提供理论依据。