红树莓总黄酮的提取、纯化及抗氧化性的研究

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本研究以红树莓为原料进行总黄酮的提取、纯化及抗氧化性能的研究。建立了分光光度法测定红树莓总黄酮,考察了溶剂提取黄酮物质的最佳工艺条件及超声辅助提取的效果,选取了纯化黄酮物质的最佳大孔吸附树脂及研究其吸附解吸性能,并利用溶剂萃取进一步纯化黄酮物质,还对红树莓总黄酮的抗氧化性能做了研究。结果表明:以芦丁为标准品,采用紫外分光光度法测定红树莓总黄酮。芦丁在0.011-0.066mg/mL的浓度范围内线性关系良好,总黄酮的平均回收率为100.7%,RSD=2.2%。此法简单、快捷、准确,可以用于测定红树莓总黄酮的含量。采用醇法提取红树莓总黄酮,研究了影响得率的主要因素,采用正交法确定了最佳提取工艺。结果表明,各因素对总黄酮提取的影响次序为:提取温度>料液比>乙醇浓度>提取时间,最佳提取条件是:以70%乙醇溶液为提取剂,料液比为1:16(g:mL),在80℃下回流提取4h。在此条件下红树莓总黄酮得率为0.152%。超声处理15min植物细胞壁已经基本破碎,继续增加超声处理时间对黄酮物质的得率影响不大。超声辅助提取可以使黄酮物质有效溶出,从而大大提高了其得率。以树脂对红树莓总黄酮的吸附量和解吸率为考察指标,选用HPD100、HPD400、D4020、HPD500、X-5、AB-8和S-8七种型号的大孔吸附树脂进行考察。结果表明,AB-8大孔树脂对红树莓黄酮物质的吸附和解吸效果最佳,吸附流速为2BV/h,吸附pH值为3.0,解吸剂为60%乙醇。AB-8大孔吸附树脂对红树莓总黄酮的纯化具有较好的重复使用性能。用乙酸乙酯对树脂纯化后的红树莓总黄酮进一步纯化。经测定,萃取后的黄酮物质纯度可达32.56%,远远高于树脂纯化后的纯度。利用纯化后的红树莓总黄酮进行了还原能力的测定、抗猪油氧化、清除羟基自由基试验和抗亚油酸氧化试验。结果表明,红树莓总黄酮有较强的还原能力、能有效抑制猪油和亚油酸氧化并能有效清除羟自由基,具有良好的抗氧化能力。
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