三白灌肠液对溃疡性结肠炎大鼠血清中TNF-α影响的研究

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目的:观察三白灌肠液保留灌肠对溃疡性结肠炎大鼠血清中TNF-a的影响,借助动物模型来分析三白灌肠液在治疗溃疡性结肠炎的作用机制,探讨本方通过保留灌肠在治疗溃疡性结肠炎中起到的疗效及其优点,进一步揭示中药保留灌肠法治疗溃疡性结肠炎的优越性。方法:选用健康清洁的Wistar大鼠50只,各组大鼠在造模前禁食不禁水24小时(除空白组外),将大鼠固定在鼠解剖台上,用10%水合氯醛(3ml/kg)麻醉,用石蜡油润滑聚丙烯管(外径2mm),缓慢插入大鼠肛门上段8cm结肠内即可,注入5%的TNBS与50%乙醇以12:5比例混合的复合物每只0.8ml (其中TNBS120mg/kg),提起大鼠尾部,持续倒置1min,使造模剂充分进入大鼠肠腔内,使大鼠头部倾斜向下平卧,捏紧肛门口2min,至自然清醒,正常饲养。三白灌肠液分高、低两个剂量(3.33g/kg,13.34g/kg)给药治疗,阳性组用美沙拉嗪(0.5g/kg)治疗,并设模型组及空白对照组。治疗过程以及第14天结束时记录大鼠的一般行为学表现对其评分,评分结果进行统计学分析。观察各组大鼠结肠组织的变化。并对其损伤程度评分,评分结果进行统计学分析。同时将取大小约0.5cm病变组织,进行HE染色,在光镜下观察各组结肠组织的病理变化。治疗结束采血并制备血清样本,采用ELISA法检测血清样本中TNF-a的含量,并进行统计学分析结果:各组大鼠在给药24小时测量体质重时均下降,符合造模后体重变化情况,模型组大鼠第7d体重降低(P<0.05)。在DAI评分中,模型组高于其他造模组(P﹤0.05),全部造模组DAI评分明显高于空白组,治疗组之间的差异无统计学意义。结肠损伤情况观察:模型组见单个溃疡,溃疡周围见渗出、水肿,三白灌肠液高剂量组见少量炎症渗出,腺体排列整齐,低剂量组腺体排列不整齐、伴炎症渗出,美沙拉嗪组大鼠基本与空白组相似。模型组大鼠血清TNF-a含量明显高于空白组,两组比较有显著性差异(P<0.01)。三白灌肠液高剂量组大鼠血清TNF-a含量低于模型组,有非常显著性差异(p<0.01)。美沙拉嗪组与三白灌肠液高剂量组比较无差异(P>0.05)。结论:通过本实验研究发现三白灌肠液高剂量组降低了大鼠血清中TNF-a的含量,改善了结肠粘膜的局部损伤,明显修复溃疡面,从而提示三白灌肠液对UC大鼠有较好的疗效。其作用机理是通过调节免疫、减轻肠道炎症、保护肠粘膜、促进溃疡面愈合,从而达到治疗溃疡性结肠炎的作用。
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