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从牛瘤胃中分离高产纤维素酶细菌,经纤维素刚果红平板初筛、摇瓶培养、固态发酵复筛、得到一株芽孢杆菌X4,该菌不仅可降解纤维素,且自身具固氮能力。最适生长PH为7左右,最适生长温度为37℃。在发酵过程中与其他菌株能很好共生。同时从牛瘤胃中分离、筛选得酵母Y2,实验证明该菌株与其他发酵菌株具良好配伍性,能利用混菌发酵产生的还原糖迅速生长,达到较高的生物量。 利用氨法和白腐真菌L:对玉米秸秆进行前期处理,依据多种微生物共生及代谢的特性,采用多菌种混合共发酵方式,将康宁木霉和选育出的高活性黑曲霉S",瘤胃细菌X4,酵母Y:,接种于前处理过的玉米秸秆上共发酵,利用正交试验,得出:在发酵温度30℃,PH5.0发酵9天后,粗蛋白含量达24.61%,纤维素降解率为48.37%。 对酵母Y:原生质体的制备、再生条件进行探索:采用对数生长前期(约24h)的菌体细胞,用1.5%蜗牛酶,0.1%p—巯基乙醇,处理60min,原生质体形成率可达95%,用0.6ml/l蔗糖做渗透稳定剂,原生质体再生效果最佳,再生率为6.32%。 采用He-Ne激光诱变酵母Y:原生质体,获得一株是出发菌株产生物量1.31倍的酵母Y:。经酯酶同工酶谱分析,其酶带条纹数,迁移率等均发生了明显变化,利用Y:和混菌共发酵实验结果表明,产物中粗蛋白可提高到28.10%,此时纤维素降解率为51.12%。