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目的:趋化因子受体CXCR4,是G蛋白偶联的7次跨膜蛋白受体,最初是作为一个孤儿受体(orphan receptor)克隆,并命名为LESTR/fusin,直到SDF-1确认为其配体后,LESTR/fusin正式命名为CXCR4。上皮间质转化(EMT)是指上皮细胞在特定的病理生理情况下向间质细胞转化的现象,细胞表型发生改变,上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)等上皮标志物丢失,以及黏附蛋白的辅助分子β-连环素(β-catenin)的入核。本实验通过检测非小细胞肺癌(non small cell lungcancer,NSCLC)中趋化因子受体4(CXCR4)、上皮钙粘连素(E-Cadherin,E-Cad)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达情况,分析它们在非小细胞肺癌中的表达与临床病理参数,及其相互之间的关系,探讨CXCR4与EMT在非小细胞肺癌中浸润和转移的关系。
方法:
1.采用免疫组织化学SP法检测73例非小细胞肺癌组织和20例正常肺组织中CXCR4,E-cadherin,β-catenin蛋白表达;
2.采用RT-PCR方法检测其中47例非小细胞肺癌组织和15例正常肺组织中CXCR4,E-cadherin mRNA的表达;
3.采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。采用t检验对计量资料进行统计学分析,采用x2检验对计数资料进行统计学分析,用Spearman等级相关进行相关分析,检验水准α=0.05。
结果:
1、CXCR4、E-cadherin、β-catenin蛋白在NSCLC中的表达CXCR4蛋白在NSCLC中的阳性表达率65.75%(48/73),明显高于正常肺组织的阳性表达率15%(3/20),P<0.05; E-cadherin蛋白阳性表达率17.81%(13/73),明显低于正常肺组织的阳性表达率85.00%(17/20),P<0.05;β-catenin蛋白异常表达率89.04%(60/73),明显高于正常肺组织的异常表达率20.00%(4/20),P<0.05。
2、CXCR4、E-cadherin、β-catenin蛋白与NSCLC临床病理参数的关系CXCR4蛋白在NSCLC中的表达与淋巴结转移及TNM临床分期相关(P<0.05),与性别、年龄、病理类型、分化程度无关(P>0.05); E-cadherin蛋白表达与淋巴结转移及分化程度相关(P<0.05),与性别、年龄、病理类型、TNM临床分期无关(P>0.05);β-catenin蛋白的异常表达与淋巴结转移及分化程度相关(P<0.05),与性别、年龄、病理类型、TNM临床分期无关(P>0.05)。
3、CXCR4、E-cadherin mRNA在NSCLC中的表达CXCR4、E-cadherin分别为200bp、362bp处显带,为阳性表达。CXCR4 mRNA在NSCLC中的阳性表达率为76.60%(36/47),明显高于正常肺组织的阳性表达率6.67%(1/15),P<0.05;E-cadherin mRNA在NSCLC中的阳性表达率为21.28%(10/47),明显低于正常肺组织的阳性表达率100.00%(15/15),P<0.05。
4、CXCR4、E-cadherin mRNA与NSCLC临床病理参数的关系CXCR4mRNA在NSCLC中的表达与淋巴结转移及TNM临床分期相关(P<0.05),与性别、年龄、病理类型、分化程度无关(P>0.05); E-cadherin mRNA在NSCLC中的表达与淋巴结转移相关(P<0.05),与性别、年龄、病理类型、分化程度、TNM临床分期无关(P>0.05)。
5、CXCR4、E-cadherin和β-catenin蛋白及mRNA在NSCLC中表达的相关性E-cadherin蛋白的膜表达减少或缺失与CXCR4蛋白的表达及β-catenin蛋白的异常表达呈负相关性(r分别为-0.343,-0.295;P<0.05);CXCR4蛋白的表达与β-catenin异常表达呈正相关(r=0.301,P<0.01)。CXCR4 mRNA表达与E-cadherinmRNA表达负相关性(r=-0.327,P<0.05)。
6、CXCR4、E-cadherin mRNA和蛋白在NSCLC中表达的一致性47例NSCLC组织中CXCR4 mRNA和蛋白同时表达者有25例,CXCR4mRNA和蛋白都不表达者7例,NSCLC组织中CXCR4 mRNA和蛋白的表达具有很高的一致性。(McNemar Test x2=2.4 P>0.05);47例NSCLC组织中E-cadherinmRNA和蛋白同时表达者有2例,E-cadherin mRNA和蛋白同时不表达者有29例,NSCLC组织中E-cadherin mRNA和蛋白的表达具有很高的一致性。(McNemar Testx2=0.06 P>0.05)。
结论:
1.E-cadherin低表达和β-catenin异常表达,提示非小细胞肺癌在发生恶性转化的过程中伴随有EMT的过程,使得肺癌细胞获得侵袭力。
2.CXCR4在NSCLC中高表达可能参与NSCLC的发展,浸润和转移。
3.CXCR4可能参与诱导了EMT的过程,从而导致NSCLC的浸润和转移。